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细胞培养常见问题及解答

1.如何选用特殊细胞系培养基？培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，首先选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。2.何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。

细胞冻存相关实验操作

一、怎样冻存动物细胞?一个实验室得到一个新的细胞株后，首先要把该细胞株培养扩增后冻存起来。细胞冻存首先可以在由于污染等情况丢失细胞时有备份可用，另外几乎所有细胞在培养传代的过程中发生一定程度的变异，为了保持实验结果的一致，一般细胞在培养几十代以后就不能再使用了，需要将冻存的，传代较少的细胞化冻

细胞不贴壁、生长缓慢是什么原因（附带解决方法）

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，这些问题从细胞生长角度来说，针对细胞不贴壁、生长缓慢、生长不好，甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞不贴壁可能原因：●胰蛋白酶消化过度；●支原体污染；●培养基pH值过碱（NaHCO3分解）；●细胞老化；●

PCR技术的临床应用

单克隆抗体技术曾使免疫学理论与实践有了新的突破，近几年来PCR技术使分子生物学及相关学科发生了一次方法学的革命。在不到10年的时间内，在以下几个领域中PCR技术已具有实用价值，且其应用范围正在不断扩大中。1、遗传病的产前诊断用胎儿羊膜细胞，羊水或甚至母血可以检查胎儿的性别，这在与性染色体关联遗传病

DNA甲基化测序方法有哪些

随着高通量测序技术（NGS）技术的发展，使我们能够从全基因组水平来分析 5’甲基胞嘧啶及组蛋白修饰等事件，由此能够发现很多传统的基因组学研究所不能发现的东西，这就是所谓的“DNA 甲基化测序"！DNA 甲基化测序方法按原理可以分成三大类：1、重亚硫酸盐测序； 2、基于限制性内切酶的测序； 3

WB的免疫印迹实验操作步骤

WB，蛋白质印迹（Western blotting）又称免疫印迹（immunoblotting）,是采用印迹技术将蛋白质转移到膜上，再根据抗原-抗体的特异性结合，检测复杂样品中的某种蛋白的方法，该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。实验原理WB实验是通过聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）将混合蛋白质样品分离后，利用特殊虹吸或电场

些挑选血清的细节分享，附带储存和使用血清方法

体外生长的细胞对微生物及一些有害有毒物质无任何抵抗力，挑选血清是一个很艰难的决定，有些血清可能前期养细胞没有看到多大的问题，但是养着养着细胞突然暴毙，之前我们一直以为是细胞或者培养基的问题，后来给血清做完质谱之后，发现血清里含有的生长激素竟然是人体可以承受的几倍；以下我们分享一些挑选血清的细节

什么是细胞迁移与侵袭，细胞迁移的过程盘点

细胞迁移也叫做细胞爬行，细胞移动或者细胞运动，是细胞在化学信号（如：趋化因子）的驱使下沿着浓度梯度从一个区域转移到另一区域的运动，是活细胞普遍存在的一种运动形式。细胞迁移在损伤修复，细胞分化，胚胎发育，肿瘤转移等生理病理过程中普遍存在。细胞侵袭与细胞迁移比较类似，但是“侵袭”需要细胞穿过胞外

细胞克隆形成实验原理

实验原理克隆形成实验是肿瘤细胞学研究中的一种常用技术，其原理是将细胞分离成单细胞悬液，在培养基上接种培养，根据集落形成数量和大小来检测细胞增殖能力和致瘤性。该实验可用来研究肿瘤细胞的增殖能力、侵袭性，探讨细胞对不同杀伤因素的敏感性。应用简介软琼脂克隆形成实验可用于：①细胞分化的基

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