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2022-07-20
质粒转染细胞实验具体操作步骤（以24孔板培养的哺乳动物细胞为例）
转染(transfection)是细胞在一定条件下主动或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程。质粒转染对于哺乳细胞蛋白的表达至关重要，转染的方法和步骤直接影响着转染的成功与否。现在一起学习一下质粒转染的具体步骤：以24孔板培养的哺乳动物细胞为例：1、种细胞；a、贴壁细胞：转染前一天每孔0.5-2×10E5个
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2022-07-19
基因改造项目磷酸钙转染法，磷酸钙转染法的原理
要想将外源基因从细胞外导入到靶细胞中改造其基因，除了之前介绍的显微注射法和电穿孔技术之外，本节将介绍第三种技术：磷酸钙转染法。磷酸钙转染法的原理是：借助形成一种DNA-磷酸钙沉淀物，使其粘附于细胞表面，进而通过细胞对该沉淀物的内吞作用而使DNA被细胞捕获。此方法可广泛用于转染多种类型的真核细胞，不但
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2022-07-19
做流式细胞实验荧光染料怎么选择
流式干细胞实验中荧光染料如何选择（1）确定荧光染料本身所适合的流式干细胞仪，需要了解染料的激发波长和发射波长、仪器所配制的检测滤光片和激发光源。（2）了解荧光素的相对荧光强度：相对荧光强度反映的是荧光素-单抗结合物的亮度，其判断标准是染色指数。影响相对荧光强度的因素包括：不同仪器的激光及滤片
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2022-07-19
细胞克隆形成实验原理及实验过程（平板克隆形成、软琼脂克隆形成）
细胞克隆形成实验原理细胞克隆形成实验是用来检测细胞增殖能力、侵袭性、对杀伤因素敏感性等项目的重要技术方法。当单个细胞在体外增殖6代以上，其后代所组成的细胞群体，成为集落或克隆。其中细胞克隆形成率即细胞接种存活率，表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。贴壁后的细胞不一定每个都能增
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2022-07-18
小鼠中分离和培养肾上腺细胞详细操作
肾上腺由两个组织组成，皮质和髓质，结合在一个胶囊下。肾上腺干/祖细胞在发育和体内平衡中起着关键作用。今天我们分享一下从小鼠中分离和体外培养肾上腺细胞的实验操作与注意事项。从Netin-GFP小鼠中分离和分化肾上腺皮质和肾上腺素干细胞和祖细胞。这个方案也可用于分离其他肾上腺细胞和其他小鼠菌株。请参阅下面
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2022-07-18
细胞培养常见七大的误区，细胞培养过程中存在的几大误区解析
细胞培养常见七大的误区，细胞培养过程中存在的几大误区解析细胞培养过程中时常会出现这样或那样的问题，别小看细胞培养,里面却蕴含着大学问。通过与使用者的沟通，你会发现了很多可以避免的问题发生，下面对细胞培养过程中存在的几大误区做详细解析。误区一:XX实验室培养XX细胞用的就是这个培养基，我用一
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2022-07-18
细胞生长不良的原因及对应的解决方案
细胞培养是生命科学实验中的基础实验，在细胞生长过程中，很多因素都会造成细胞生长不良。下面百越生物总结了下细胞生长不良的原因及对应的解决方案。为什么细胞解冻后缺少活力，活细胞占比较低?这种现象可能主要由以下几种原因所导致：1.培养物冻存液等质量欠缺。解决方案：a.确保用来制备储存物(冻存
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2022-07-18
细胞培养常见问题及解决方法
细胞培养也叫细胞克隆技术，指的是细胞在体外条件下的生长，在培养的过程中细胞不再形成组织，培养物是单个细胞或细胞群。细胞在培养时都要生活在人工环境中，由于环境的改变，细胞可能会受一些其他因素的影响，从而导致在细胞培养过程中出现各种各样的问题，常见问题有哪些呢？一、悬浮细胞成簇可能原因：
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2022-07-17
免疫组化和免疫荧光有哪些区别和不同
免疫组化和免疫荧光的区别，两种实验技术都是我们病理分析时常用的技术手段，那他们有哪些区别和不同呢？免疫组化与免疫荧光两者都是蛋白定位的检测(也就是确定蛋白是表达在细胞核/浆/膜)。其区别是：1、概念和基本原理免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗
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