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提高电穿孔法转染的效率方法

电穿孔法难点在于提高电穿孔的效率。实验操作者一般能从电转仪厂家得到转染的详细方案和优化指导。当你需要自己优化转染效率时，可以从以下方面进行：1、外加电场的强度：电压过低，细胞膜不能形成小孔，使得外源分子通过；电压过高，细胞会受到不可逆损伤，以至于裂解。对于大部分哺乳细胞来说，电压250～500V/cm是

原代细胞培养方法有哪些（简单实用）

很多老师在设计科研实验的时候都会很迷茫，到底用什么细胞好？越来越多的老师开始倾向于原代细胞的科研实验，在设计实验中，原代细胞和细胞株到底该怎么选择呢？原代细胞的定义：原代细胞的培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。因此，较为严格地说是指成功传代之前的培养，此时的细胞保持原

真菌细菌污染的预防方法

请遵守细胞污染永恒定律：无论什么细胞只要是不重要的细胞污染了，立刻加84弃之，重新复苏新冻存管培养；实在需要挽救的请参考以下：细菌污染：主要有洋葱霍尔伯德菌型污染确定是非常珍贵的细胞建议分别配置含10倍庆大霉素和两性霉素溶液（G/A)的PBS和5倍庆大霉素和两性霉素溶液（G/A)的*培养基各一份。然后

细胞培养注意事项（4个点）

培养细胞的*培养基一般由基础培养基（如MEM）和添加剂（血清或细胞生长因子）组成，培养基的配方都会随着细胞需要的营养不断的改进，而抗生素也是，广谱抗生素使用太多，会导致细胞的耐受性提高，从而产生抗性，甚至有些老师为了实验的精确性，选择不用抗生素培养细胞。一、基础培养基绝大多数培养基是建立在

流式细胞仪技术是干什么的

流式细胞仪技术，主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光，经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点，当每个细胞经过焦点时，发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置)，光检测器把散射光定量转化成电信号，经数字转换器进行数

细胞培养中细胞不贴壁了怎么办

细胞贴壁原理大多数的哺乳动物细胞在体内和体外均附着于一定的底物而生长，在体外时这些底物可以是其他细胞、胶原、玻璃或塑料等。贴壁的过程：细胞首先分泌细胞外基质，这种细胞外基质黏附在支持物的表面（培养瓶，培养皿的底面）。然后，细胞通过其表面表达的黏附因子与这些细胞外基质结合。贴壁过程一些

qPCR实验中影响Cq值的相关因素

qPCR实验中许多因素会影响您的 C q 值。您的样品之间C q 值的一些差异将是由于生物事件，例如您的目标基因响应治疗而上调/下调。然而，C q 值同样容易受到 PCR 反应准备和 PCR 组分本身的影响。比较常见的是以下几种情况：1. 主混音溶液中的 pH 值和盐浓度会影响荧光发射。荧光发射的任何变化都会自然地改变

原生质体叶肉细胞瞬时表达

1、生长培养好的试验材料（一般为生长20天左右的拟南芥幼苗叶片）2、在拟南芥开花前取样（30片叶子左右即可）3、切取叶片为0.5-1mm的细条（如果材料能达到每克107个原生质体，10-20片叶子需要5-10mL酶解液）4、迅速将切下的样品转到酶解液中，要求完全浸没。5、黑暗条件下抽真空30min。6、连续酶解

细胞周期检查点及其调节机制是怎样的

细胞周期检查点：众所周知，细胞通常在体积翻倍时进行分裂，但实际上细胞分裂过程的控制非常复杂且精确。细胞分裂的所有过程或步骤都是按顺序发生的，并且细胞知道何时进行以及何时等待和停止细胞分裂。在 DNA 复制完成之前或当染色体或纺锤体纤维受损时，连续的细胞分裂会给细胞甚至有机体带来灾难性的后果。

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