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2023-05-10
His标签蛋白纯化原理与步骤盘点
His标签是由6至10个组氨酸残基组成的一种表位标签,很容易被标签特异性抗体识别。His标签是蛋白纯化和检测的常用标签之一,由于其分子量小(只有0.84KD),融合到重组蛋白后,不会影响标记蛋白质的结构和生化特性。His抗体可以用于检测和His标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测His融合表达蛋
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2023-05-10
单细胞分离技术有哪些
进行单细胞测序,首先要进行单细胞的分离。尽管目前已有多种从异质性细胞群体中分离单细胞的方法,但分离单细胞依然是一项巨大的技术挑战。常用的单细胞分离方法主要有:连续稀释法、口吸管技术、显微操作法、荧光流式分选法、激光捕获显微切割技术以及微流控技术等。这些方法各有利弊,要根据具体情况选择合适的方法。
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2023-05-10
单抗制备步骤流程及注意事项
脾细胞的准备:将Balb/c小鼠拉颈脱臼处死,浸泡于75%酒精3~5min。无菌操作取出脾脏,置于盛有5mL不完全培养液的平皿中,洗涤3次去除脾脏表面的脂肪和结缔组织。将洗好的脾脏用剪刀剪成3~5个小块,然后将脾脏研碎,过细胞筛,收集细胞。将脾脏细胞悬液在1000r/min条件下,离心5min,弃上清。再以同样的方法
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2023-05-10
抗原分为哪几类,抗原分类介绍
抗原是一种能引发机体产生免疫应答并且可以被抗体结合的物质。抗原通常是蛋白质,肽或多糖等物质,而脂质和核酸可与这些分子结合形成更复杂的抗原,如脂多糖。抗原根据来源、性质和功能等不同可划分为不同的类型。抗原分类1.根据来源分类外源性抗原(exogenous antigen)外源性抗原是指通过吸入,摄取
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2023-05-09
杂交瘤细胞测序步骤(附带优势和引用讲解)
在杂交瘤细胞制备过程中,经过单克隆筛选之后,杂交瘤细胞应尽快冷冻保存。但在保存过程中,杂交瘤细胞有丢失高特异性/高活性,甚至死亡的风险,为了克服杂交瘤细胞保存的劣势,我们可以对杂交瘤细胞进行测序,随着现代生物技术的发展,测序方法具有高度的灵活性,可快速、准确地实现对杂交瘤细胞抗体轻/重链可变区或全
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2023-05-09
噬菌体抗体库的构建,噬菌体抗体库构建流程讲解
噬菌体抗体库技术是由抗体基因文库技术和噬菌体表面展示技术相结合而形成的一项新的基因工程抗体技术。利用这一技术可以得到完全人源性的抗体,在病毒感染疾病及肿瘤诊治方面均具有重要的应用价值。基本原理利用PCR技术从人免疫细胞中扩増出整套的抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因,克隆到噬菌体载体上并
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2023-05-09
酵母细胞表面展示技术,系统基本组成和系统的类型盘点
酵母细胞表面展示技术是一种真核蛋白表达系统,其利用酵母细胞表面展示系统(拥有完善的蛋白质翻译后修饰和分泌机制)将异源真核蛋白固定并展示在酵母细胞表面,已在蛋白质文库筛选、蛋白质定向进化、高亲和性抗体分选、抗原/抗体库构建、亲和力成熟、疫苗生产、免疫生物催化和生物传感器等多个领域应用广泛。酵母细
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2023-05-09
细胞培养中的支原体污染怎样处理?
用扫描电镜方法简便快速①相差显微境检测:将细胞按种于事先放置于培养瓶内的盖玻片上腔灶,24h后取出,用相差油镜观察.支原体呈暗色微小颗粒位于细胞表面和细胞之间。②荧光染色法:荧光染色用能与dna特异性结合的荧光染料hoechst33258,可使支原体内含有的dna着色,染色后用荧光显微镜观察。具体方法如下
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2023-05-08
细胞低氧培养怎么实验(细胞低氧培养装置)
细胞低氧培养是一种近年来比较热门的细胞培养技术,可以模拟体内缺氧环境,从而研究细胞在低氧条件下的生理和病理过程。下面我们就来详细介绍一下如何进行细胞低氧培养实验。我们需要准备好以下实验材料:CO2孵化器低氧箱含有5% CO2的高压钢瓶含有0.5% O2、5% CO2和94.5% N2的高压钢瓶缺氧指示剂(比如Methylene Blue)生长
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