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细胞培养中的支原体污染怎样处理?

2023-05-09 10:20:03
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  用扫描电镜方法简便快速

  ①相差显微境检测:将细胞按种于事先放置于培养瓶内的盖玻片上腔灶,24h后取出,用相差油镜观察.支原体呈暗色微小颗粒位于细胞表面和细胞之间。

  ②荧光染色法:荧光染色用能与dna特异性结合的荧光染料hoechst

  33258,可使支原体内含有的dna着色,染色后用荧光显微镜观察。具体方法如下:首先将细胞接种盖玻片上,在细胞未长满前取出玻片,用不合酚红的hanks液漂洗一下,用l:

  3醋酸甲酵固定10min,然后用生理盐水漂洗.置于用生理盐水配浓度为50pg/ml的hoechst

  33258中染色10min。染色后用蒸溜水洗1—2min.向细胞面滴加ph5.5磷酸缓冲液数滴,然后置荧光显微镜下观察。镜下支原体为散在于细胞同围或附于细胞膜表面的亮绿色小点。

  ③电镜检查;用扫描电伍誉扮镜方法简便快速.也可以利用透射电镜。

  ④dna分子条文检查或支原体培养等方法:检出虚模率高.但方法较为复杂


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