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耐药细胞株构建注意事项

2023-06-12 10:27:20
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  细胞与低剂量的药物长期接触,引起细胞本身药物化学过程的改变,细胞膜上出现Pgp糖蛋白,使细胞逐渐对药物耐受,随着药物浓度的递增,其耐受程度逐渐加强。

  耐药细胞培养的优点:

  1.研究的对象是活细胞

  在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

  2.研究条件可以人为控制

  pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,产品仅供科研可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。

  3.研究的样本可以达到比较均一性

  通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

  4.研究内容便于观察、检测和记录

  采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

  耐药细胞的实验要点说明:

  1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

  2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;

  3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

  4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

  5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

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