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内细胞中间密两边稀如何解决

2023-04-23 10:32:46
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  这是典型的“过犹不及”。我们在接种细胞的时候通常使用“十字摇匀法”,即前后、左右各来回几次。但很多人担心摇的次数少会造成细胞分布不均匀,就反复多次地摇,结果细胞全部集中在中间。其实只要把握好幅度和力度,前后、左右交替摇三四次就已经足够了,不论孔板、皿或者培养瓶。对于孔板这样的较小的容器,实际每孔加的培养基总量不会超过2mL,不如直接用合适的移液枪在孔板内吹打之后放平,更能获得良好的效果。

  ✅ 细胞活力及浓度:细胞应在生长良好、致密度约为80-90%、活力达90%以上的状态下冻存。细胞活力差的细胞在冻存后的成活率很小,因此,一定要在细胞分裂旺盛时期冻存。

  ✅ 冻存密度:冻存时细胞密度少于5×105个活细胞/mL时,很难成功复苏。

  ✅ 冻存管盖子拧紧:冻存管的盖子一定要拧紧,否则水浴复苏时水会渗入造成污染。

  ✅ 冻存时间:细胞不可长期保存在-80℃冰箱中。我们建议在-80℃冰箱中的保存时间不要超过48h。


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