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胰酶消化久了细胞会死吗,胰酶消化过久会提高细胞的凋亡率

2023-03-08 10:33:48
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  一般说来,胰酶消化时间过长,对细胞会造成损伤,影响其活力,甚至细胞破碎。如果胰酶消化时间过长,就要注意在加入胰酶消化前先用PBS冲洗一下培养瓶,这样可提高胰酶消化能力,缩短消化时间;另外,可以在配制胰酶时加入EDTA,这样就更易消化细胞。

  如果细胞长久不贴壁,可试用下面的方法:

  1、将细胞接种到培养后,静置12小时或者更长时间后再取出观察是否贴壁,因为频繁地移到培养瓶影响细胞的贴壁,但很多人都喜欢在分瓶后1小时观察细胞贴壁情况,其实这样会影响细胞贴壁;

  2、检查你的胰酶中是否加入了EDTA,如果有,那么就要重新配制没有EDTA的胰酶。

  【其它参考答案】

  用胰酶消化的时间长段,与酶的活性、是否加入了EDTA、消化前血清洗得是否干净以及细胞本身的特性都有很大的关系。

  在消化细胞的时候,用的是0.25%的胰酶+0.02%EDTA。加入EDTA后,可以缩短胰酶的消化时间,以减少对细胞的损伤。

  胰酶消化时间过长的话,会影响细胞的活力,使细胞贴壁受到很大的影响,甚至直接导致细胞死亡。对于在细胞膜表面的蛋白,如果用胰酶消化时间过长,也可能在一定程度上,影响这些蛋白的检测结果。

  如果觉得细胞消化的时间太长的话,可以尝试如下方法:

  1、如果没有加EDTA,建议加入EDTA;

  2、如果胰酶浓度较低,可以提高浓度至0.25%;

  3、可以将胰酶先放入细胞培养箱,使其温度提高至37℃,再进行消化,可以大增加胰酶的消化能力。


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