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细胞实验怎么防污染(防止细胞培养出现污染的方法)

2023-02-23 10:35:08
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  细胞实验一项很精细的操作,一个步骤做错,就会功亏一篑,所以细胞实验的空间室要求非常严谨,进行细胞实验室时,需要在无菌的环境下进行,绝一切可能的污染源,如果造成污染,实验结果就会出现偏差,就必须重新检测,不仅浪费时间和精力,反而进一步提升实验成本,预防是重中之重,现在来列举一些方法,看看你做对了那些。

  ①在实验的时候,引入新的细胞系,或者培养保存的细胞,还未鉴定或检测,有可能给实验室带来污染,所以都需要先鉴定新的细胞系和保存的细胞系,没有污染过否则一开始就错了,后面的结果可想而知。

  ②实验用品的消毒防止污染。细胞培养所需要用到:试剂、耗材、器材的消毒要彻底,各种溶液灭菌要仔细,并在无菌实验检测阴性后才能使用。其他无菌器材也要定期消毒、灭菌、清洗。

  ③实验操作时过于专注一根管子做到底,会导致污染,需要及时更换巴斯德吸管、移液枪枪头和移液管,发现接触过非洁净或者无法确定洁净的物品,快速替换不可再用,操作完毕后,需收拾好实验室,再用75%清理收尾。

  ④在细胞培养间不要随意走动,会响生物安全柜的风帘,实验开始前用75%酒精棉球擦手和瓶盖,事前要再三检查实验中使用的器材、溶液、细胞,确保都是清洗和消毒过的,以免疏忽带入无菌室内,造成实验污染。

  ⑤实验操作前需调整身体状态,保持良好,避免在实验过程中有咳嗽打喷嚏情况发生,还有保持不说话,以免造成不必要的污染。

  ⑥衣着注意,容易起静电或吸灰尘的衣服都要换成白大褂,以及确定手套完好无损,接触过生物安全柜之外的物品,必须对手套进行消毒。

  ⑦器皿使用的时候,瓶盖要远离操作地方,并且倒放,以免瓶盖被误操作污染。注意不在敞开容器口上方经过,以免衣物在其他地方沾染不明物体,掉落污染

  ⑧防止交叉污染:细胞实验中有多类型细胞培养操作,需要区分培养的器具,做好标记,依次进行操作,一种细胞做好,再做下一个,以免一起操时出现混乱进行传代操作或换液时,有疏忽的人把粘有细胞移液枪头和移液触及试剂瓶瓶口,把细胞带到培养基中进而污染其他细胞,需要注意使用的细胞一旦购置,或从别处引入,或自己建立,要及时保种冻存,如发生污染可重新复苏细胞,继续培养。

  ⑨工具选择:需要选择有无风扇设计、一体成型的培养箱体,方便清洁,可减少污染,平时实验时,保证每月1-3次清理,减少打开门次数,避免对温度、培养基中PH值调节的影响。移液工具,跟实验室一般的双按钮移液器相比,单按钮移液器能更好地减少气溶胶污染,因为单按钮移液器打出吸头时活塞不用回弹,而且直接按下去。

  如何防止细胞培养出现污染

  防止细胞培养出现污染的方法如下:

  1、从培养箱取放细胞前,用酒精清洁双手(或手套),尽量缩短开门时间和减少开门次数。培养瓶放入培养箱前,用酒精消毒表面,并稍等至酒精挥发后再放入,以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。

  2、操作的时候防护服、口罩、手套缺一不可。操作前,准备好所有实验所需物品,以减少走动,物品需有序摆放在超净台触手可及的地方,同时空留足够操作空间。

  3、操作时,试剂不用尽量及时盖上盖子,移至操作区外围,尽量不要从开口容器上经过。

  4、使用移液枪时,将容器倾斜以便于移液,切勿将枪杆碰触瓶口及内壁。一旦发生倒吸情况,要及时用酒精棉球擦拭,以免液体残留导致细菌滋生。

  5、冻存细胞时冻存管盖子需拧紧。复苏细胞时,从液氮罐取出冻存管,轻拧盖子,以确认盖子是否拧紧。

  扩展资料:

  1、细菌污染培养基的处理方法。可在培养液中加相应的抗生素处理。可以用四环素,庆大霉素,或者链霉素,前两者的工作浓度是50 μg/mL;链霉素的工作浓度是100 μg/mL。

  2、霉菌污染培养基的处理方法。细胞一旦被霉菌污染,很难挽救,两性霉素B或制霉菌素都于事无补,建议果断舍弃该污染细胞,将环境彻底消毒。

  参考资料:中国知网-防止细胞培养污染的技术措施


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