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细胞株的传代事项有哪些(细胞株的传代分析)

2023-01-15 10:23:37
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  细胞株即为从组织中分离的原代培养物经*传代培养成功后即成细胞系;通过选择和克隆形成以原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养物。

  细胞株的传代分析:

  消化细胞制备细胞悬液,根据稀释比例和试验需要,将等比例的细胞悬液分别加入新的细胞培养瓶中,并加入适量的细胞培养基进行细胞培养,并记录相关的记录中。

  备注:细胞培养基中的血清比例可以根据细胞生长状态在5%-20%范围进行调整。传代的比例(稀释比例)建议在1/3-1/10之间。

  1.直接传代法

  ①待悬浮细胞长满至80%-90%(细胞悬液变黄),即可传代;

  ②用吸管吸弃细胞悬液1/2-1/3;

  ③加入适量的新鲜培养基,继续培养。

  2.离心传代法

  ①将细胞悬液转移到离心管内;

  ②150g离心5min,弃去上层清液;

  ③使用新鲜的培养基重悬细胞;

  ④吸管吸取适量细胞悬液,装入新的培养瓶,再加入适量的新鲜培养基,继续培养。

  注意事项:

  1.严格的无菌操作。

  2.细胞消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响,消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。

  3.传代细胞所有的操作尽量靠近酒精灯火焰。每次只进行一种细胞的操作,每种细胞使用一套器材。避免交叉感染。

  4.传代细胞瓶口每次打开或者关闭都需要在酒精灯上消毒。


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