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细胞传代密度相关问题

2022-12-08 10:38:19
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细胞传代密度相关问题

  01

  传代密度过高

  一旦细胞养太久至融合度过高(>90%)才传代,容易使细胞产生老化现象,甚至是堆叠,再消化细胞时不易吹打成单颗细胞,即便再重新铺盘传代,细胞也无法回到原本的特性了。(如:单层细胞,没长满就发生堆叠现象)。

  解决方案

  尽量避免融合度过高,镜下观察融合度约达到80%即可传代分盘。

  细胞融合度:在细胞培养中指的是细胞在培养表面(培养皿/瓶)所占的比例。

  02

  传代密度过低

  哺乳动物贴壁培养细胞,若细胞培养到80-90%密度需要开始传代,在传代接种细胞密度过低,细胞间距离太远,就无法在细胞间产生黏附及通信作用,帮助信号传导并活化细胞;总体细胞量不足,分泌的生长因子浓度会不足以产生利于生长的微环境,以上皆会造成增殖速度迟缓或细胞死亡。

  解决方案

  细胞传代时,要进行准确的细胞计数,确保铺盘的密度。

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