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高效摇瓶进行细胞传代方法

发布时间:2022-11-29 10:40:00 阅读:11022次 来源:百度学术

  细胞传代培养是指将培养物分割成小的部分,重新接种到另外的培养器皿(瓶)内,再进行培养的过程。高效摇瓶是悬浮细胞培养常用的耗材,那么怎样利用这种容器对细胞进行传代呢?

  从悬浮细胞的特性上来看,这种细胞是不贴壁的,所以不需要酶的作用就可以使细胞从高效摇瓶表面脱离。一般实验室中常用直接传代法和离心传代法来进行悬浮细胞的传代。当观察到细胞长满至 80%~90%(细胞悬液变黄)的时候,细胞就可以进行传代操作了。

  怎样利用高效摇瓶进行细胞传代从显微镜下观察,如果细胞生长状态良好时,可以选择直接传代法。将高效摇瓶中的培养基按比例分装到新的培养瓶中,补加新鲜培养基,隔天观察细胞密度确定是否需要补液。如果细胞状态较差时则需要使用离心传代法,首先将细胞悬液转移到离心管内,1000rpm 离心 5 min,然后弃去上层清液,轻轻地将细胞沉淀弹散,使用新鲜的培养基重悬细胞,最后用吸管吸取适量细胞悬液,装入新的培养瓶,再加入适量的新鲜培养基,继续培养。

  利用高效摇瓶进行悬浮细胞的传代主要有直接传代法和离心传代法两种方式,具体选择哪种方式进行传代要根据细胞的生长状态来确定。


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