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DNA粗提取与鉴定实验过程

2022-09-28 10:34:10
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  1、实验原理:DNA与杂质的溶解度不同,在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,在0.14mol/l的NaCl溶液中溶解度最低。

  2、实验设计:

  ①实验材料的选取:凡是含有DNA的生物材料都可以考虑,但是使用DNA含量相对较高的生物组织,成功的可能性更大。

  ②破碎细胞:动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。

  ③去除滤液中的杂质:利用DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同,控制NaCl溶液的浓度去除杂质。

  ④DNA的析出:将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液,静置2~3min,溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水分。

  ⑤DNA的鉴定:取两支20ml的试管,各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂。混合均匀后,将试管置于沸水中加热5min,待试管冷却后,比较两支试管溶液颜色的变化,看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。


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