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怎么从血清检测指标评价优质血清?

2022-09-08 10:30:16
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  牛血清是目前细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的、细胞生长必需的营养成分,具有极为重要的功能。

  要保证血清质量,需要有严格的质控,包括从外观到理化性质、细胞增殖试验和微生物检查,制定一系列的标准,以及出厂产品能符合这些标准。

  以胎牛血清为例,优质的特级胎牛血清,外观应是淡棕色至橙色透明液体,无颗粒物沉淀。

  PH在6.7-8.2之间;

  渗透压在260-340mosm/kg之间;

  血红蛋白含量小于20mg/dL;

  总蛋白含量在30-50g/L;

  白蛋白含量在14-34g/L;

  α、β、γ球蛋白含量则以实际测量为准;

  之前的文章中有详细介绍球蛋白与细胞培养之间的关系,点击链接即可查看:

  牛血清中球蛋白的作用

  IgG应小于250μg/mL;

  内毒素含量应小于3EU/mL;

  关于细胞培养过程中的内毒素,我们也有专门的文章介绍过:

  内毒素对细胞的危害到底有多大?

  优质的特级胎牛血清还要经过严格的无菌检测。确保血清无污染。

  检测项目包括厌氧菌、好氧菌、真菌(最容易污染细胞的酵母菌和霉菌都应包括在内)以及支原体检测。检测结果应全部为阴性,视为通过无菌检测。

  血清含有病毒,会导致宿主细胞发生肿胀、坏死、脱壁,不仅严重影响实验进度,更可能会对实验人员造成威胁。

  对于血清中的病毒检测,重点放在那些曾全世界大范围爆发、人畜共患或是十分常见的病毒身上。

  每个地区的法规会有些许区别,但牛副流感3型病毒(PI-3)、牛腹泻病毒(BVD)、牛细小病毒等是任何国家和地区的检测报告中,都应标注清楚的。

  一批合格的血清,所有病毒检测项目均应为阴性

  促进细胞增殖方面,也是血清一项不可忽视的指标。每一批次血清也应就克隆率、细胞毒性、细胞增殖密度、和倍增时间进行检查。

  所有检测结果应符合相应的规范。

  病毒检测反映的是动物采血时、或血清加工过程中有没有感染病毒,而抗体检测则表示该供体动物在采血前一段时间内,是否感染过病毒。

  优质的特级胎牛血清,应保证动物从始至终都没有感染过相关病毒,因此检测结果应为阴性

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