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抗体的保存条件有哪些?

2022-08-31 10:29:33
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  抗体分子完整而稳定的蛋白区使其具有抗低温和变性条件的优势,这使得长期保存抗体变得相对容易,在保存缓冲液中很少需要添加甘油或其它稳定复合物。唯一经常碰到的问题是抗体溶液的细菌或真菌污染。尽管这一点可用0. 02%的叠氮钠防止,但叠氮钠限制了抗体在许多生物学方法中的应用且干扰一些偶联方法。在抗体偶联反应中,叠氮钠可用透析或凝胶过滤的方法去除。如果抗体是用做体内试验的,千万不应加叠氮钠。此时抗体溶液应滤过除菌,而且无菌抗体必须严格无菌操作。

  收集到的血清、培养上清或腹水中的抗体常规下放在-20℃保存。盐浓度保持在0~ 150mM可适合大多数情况,抗体溶液不应反复冻融,否则容易导致凝集。抗体的凝集常影响抗体的抗原结合位点的空间结构或产生不溶物而使抗体活性丧失。

  血清、组织培养上清或腹水的保存

  1.杂交瘤上清应加1/20体积的1M Tris(pH8.0)作缓中液,腹水或血清不必加缓冲液。

  2.如果可以使用叠氨钠,应加0. 02%的叠氮钠。

  3.分装成一次性使用所需的体积,贮存于-20℃。抗体工作液直接贮存于4C可保存6个月以上。

  纯化抗体的保存

  1.调整抗体溶液的pH值至中性。PBS或相似的等渗榕液都是常用的纯化抗体保存缓冲液。

  2.纯化抗体溶液应以相对高的浓度(≥1.0mg/ml)在pH值中性条件下保存,通常使用高达10mg/ml的浓度。若抗体浓度过低,在冻存以前一般采用超滤或硫酸铵沉淀法浓缩。假如纯化的抗体不用于标记,可在低浓度的纯化抗体中加入1%BSA以提高蛋白浓度再行冻存。

  3.如不作特别要求,加入0. 02%的叠氮钠。

  4.方便起见,将抗体分装后-20℃冻存,大多数抗体在 -20℃可保存数年。抗体工作液在4C至少6个月内稳定。

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