资讯动态

贴壁细胞和悬浮细胞培养步骤解析

2022-08-24 10:21:09
|
访问量:118882

  贴壁细胞培养是指细胞贴附在一定的固相表面进行的培养。悬浮细胞培养指的是一种在受到不断搅动或摇动的液体培养基里,培养单细胞及小细胞团的组织培养系统,是非贴壁依赖性细胞的一种培养方式。

  一、 贴壁细胞培养步骤

  1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片, 显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。

  2. 用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的) .

  3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。

  4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。

  5. 用PBS 2-3mL轻轻洗细胞表面,洗3-4遍,吸走PBS,加入0.25%胰酶EDTA 1ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻吹打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止消化。

  6. 用900rpm, 3min离心,重悬细胞。

  7.换新的细胞培养瓶,放置于37℃,5% CO₂的培养箱中培养。

  二、 悬浮细胞培养步骤

  1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。

  2. 用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。

  3. 严格无菌操作,打开细胞培养瓶。细胞吹打均匀。

  4.细胞培养瓶内的细胞吹打均匀,用吸管将培养基完全吸出(严禁直接倾倒)。

  5. 900rpm, 3min离心,重悬细胞。

  6. 换新的细胞培养瓶和新鲜培养基,放置于37℃,5% CO₂的培养箱中培养。

  • 业务咨询

    业务咨询专线:133 7682 0615

    Email:lxyjy@wie-biotech.com

在线留言(即刻联系为您提供专业的解决方案) ×