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细胞污染实验怎么避免细胞污染?

发布时间:2022-08-14 10:40:10 阅读:12902次 来源:百度学术

  养细胞的人怕的就是细胞污染,细胞一污染,一夜回到解放前,一切都得从头开始,尤其是新手小白,几乎都逃不过细胞污染,避免细胞污染,重要的是操作前和操作时。

  1.  操作前,要保证所有的用品无菌,移液枪枪头、离心管、培养瓶、PBS、培养基、血清等。     高压灭菌,一般要提前一天高压灭菌,灭菌结束后放烘箱烘干,为确保充分烘干,一般需要过夜。要确保一定被高压过,像我们实验室就发生过没被高压的枪头盒放烘箱里了,从高压锅里拿瓶子时一定要拧紧瓶盖,否则就白压了。

  2.操作前紫外灯照射超净台20min左右。实验前打开超净台的通风,用酒精棉球将台面擦一遍,所有进入超净台的东西都要喷酒精。

  3.操作时,所有的玻璃瓶打开前都需在酒精灯上烤一圈,毕竟“病从口入”嘛,将瓶盖放在左侧(清洁区),保证操作时不会从上方经过。

  4.操作时注意枪头,做到悬空加样,尤其是给非无菌的离心管里加东西,给含有细胞的皿里加东西,如你从玻璃瓶里给一个含有细胞的培养皿里加培养基,那么你的枪头就不能伸到培养皿的液体里,否则你的培养基就污染了,除非你每次换枪头。

  5.注意袖口,胳膊,切记不要从打开的瓶,皿上面越过,防止落菌。

  6.手拿所有的盖子时,一定不要碰到里面。

  7.实验结束后,用酒精灯烧所有的瓶口、盖子,拧紧,用封口膜封好,我们的封口膜一般是提前剪好泡在含有酒精的瓶子里。     一般细胞污染分为细菌、真菌、支原体,支原体在显微镜下肉眼看不到,底

细菌污染

  细菌污染有时和细胞碎片不容易区别,在高倍镜下都会看到黑色小点在做布朗运动,但是细胞碎片大小不一,培养基清澈透亮,而细菌污染的黑点大小差不多,培养基浑浊,有泥沙感。

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