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T细胞增殖试验及其类型

2022-07-02 10:43:41
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  T细胞增殖试验的含义:

  T细胞增殖试验又称T细胞转化试验。T细胞在体外经某种物质刺激,细胞代谢和形态相继发生变化,在24~48h内细胞内蛋白质和核酸的合成增加,产生一系列增殖的变化,如细胞变大、细胞浆扩大、出现空泡、核仁明显、核染色质疏松等,由淋巴细胞转变为淋巴母细胞。因此,这种淋巴细胞增殖又称为淋巴细胞转化。据此可判断出淋巴细胞对有关刺激的反应性与功能状态。

  (1)非抗原性刺激物:如植物血凝素(PHA)、刀豆素A(ConA)、美洲商陆(PWM)、脂多糖(LPS),通称促有丝分裂原。其中LPS刺激B细胞,PWM可刺激T和B类细胞,PHA和ConA刺激T细胞增殖。

  (2)抗原性刺激物:如结核菌素、葡萄球菌毒素、破伤风类毒素、链球菌激酶、肿瘤抗原、同种异型组织抗原等。

  T细胞增殖试验的类型:

  (1)T细胞增殖试验形态法:其原则是将外周血液或分离的单个细胞与适量的植物血凝素(PHA)混合,置37℃培养72h,取培养细胞作涂片染色镜检。据细胞的大小、核与胞浆的比例、胞浆的染色性和核结构以及有无核仁等特征,分别计数淋巴母细胞、过渡性母细胞和核有丝分裂相以及成熟的小淋巴细胞,以前三者为转化细胞,每份标本计数200个细胞,计算转化率。

  (2)核素法:绝大多数外周血T细胞通常处于细胞周期的G0期,受特异性抗原或促有丝分裂原激活后,从G0期进入G1期,开始合成蛋白质、RNA和DNA前体物质等,为DNA复制准备物质基础,然后进入S期,细胞合成DNA量倍增,此时若在培养液中加入3H标记的TdR,后者掺入新合成的DNA中,据掺入的多少推测细胞增殖程度。


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