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细胞真菌污染处理方法(如何检测真菌污染)

发布时间:2022-03-07 10:40:00 阅读:126462次 来源:欣博盛

  真菌概述

  真菌是一类具真核和细胞壁的异养生物。真菌可以通过孢子延续种群,典型的营养体为丝状分支结构。可污染细胞培养基的真菌种类繁多,最常见的有曲霉菌,白色念珠菌,酵母菌,黑霉菌,孢子菌等。

  真菌污染症状

  与其他污染相比,真菌污染更容易被观察到。具体表现为:

  在培养基中会形成淡黄色或白色的漂浮物,肉眼可见,较易被发现

  短期内培养液多不变混浊

  显微镜下可以看见细胞之间或是培养基中,有纵横交错穿行的丝状,树枝状或管状菌丝

  多数菌丝在高倍镜下可以观察到链状排列的菌株,而念珠菌及酵母菌菌株呈卵圆形,散落在细胞上及细胞周边生长。

  真菌污染的鉴定

  将待检测的细胞培养基,接种在真菌专用培养基上进行鉴定,例如:马丁培养基、沙氏培养基等。

  真菌污染的处理方法

  首先应尽快把污染细胞与其它细胞系隔离开,不要打开培养皿,以免孢子飞出;

  同时需要对实验过程中所用的器材、试剂和操作空间做相应处理:消毒液喷洒、紫外线消毒、高温灭菌等;

  高浓度的抗生素或是抗菌素(两性霉素 B 、泰乐菌素等)对细胞会产生一定毒性,在使用前可以进行剂量反应实验确定影响;

  跟细菌污染的处理方法类似,通常情况下,霉菌污染的细胞,如果不是特别珍贵,建议直接丢弃

  与支原体和细菌不同,真菌是真核生物。真菌可以作为圆形或椭圆形体(酵母)存在,可以形成链或簇,也可以是长的细丝(菌丝)24。菌丝在污染的后期呈现模糊斑块状形成霉菌24。真菌污染是细胞培养中的一个严重问题,能够影响实验结果的有效性。更重要的是,这类型的污染极难根除,因为真菌可以通过孢子随空气流动传播。许多真菌种类的休眠孢子能在极端恶劣和不良环境中存活,一旦它们遇到合适的生长条件时就会被激活。

真菌污染

  如何检测细胞培养中的真菌污染?

  酵母是最小的真菌(3-10 μm)。它们可以透过光学显微镜看到。依据大小和生长阶段的不同,菌丝在一些情况下可以用肉眼或光学显微镜检测到。在大量污染的情况下,菌落形成的霉菌会浮在细胞培养表面。在这种情况下,不要打开容器并丢弃培养物,以免传播孢子。有时候,培养基的pH值可能增加,导致含酚红的培养基呈现粉红色。

  清除真菌预防和清除用的试剂

  Fungin™

  • 高效:杀灭真菌(酵母、菌丝和霉菌)

  • 快速:5-10天拯救细胞培养

  • 安全:对哺乳动物细胞毒性极低

  • 可靠:可作为预防方案

  Fungin™是一种抗真菌化合物,通过破坏细胞膜上离子交换来杀死不同形式的真菌(酵母、菌丝和霉菌)。Fungin™拥有高度的稳定性,不需要溶解在具有细胞毒性的脱氧胆酸盐(deoxycholate)中,因此是两性霉素B(Amphotericin B)的一个很好的替代品。可分别在低或高浓度下用于常规的预防性使用或去除污染,对细胞培养中常见的真菌污染物(如白色念珠菌和曲霉)提供了最大的保护,同时也可添加到含有常用抗菌剂(如青霉素和链霉素)的培养基中。Fungin™亦是被文献高频引用的抗真菌试剂。


本文链接:https://www.zjby-biotech.com/news/hydt/910.html

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