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细胞爬片的步骤(细胞爬片的操作方法以及特点)

发布时间:2022-02-14 10:34:38 阅读:133362次 来源:百度学术

  在医学生物研究中,免疫荧光检测等需用到细胞爬片。现有的细胞爬片多采用表面平整、光滑的透明玻璃玻片。但在做免疫荧光检测时,为了节约抗体,需免疫组化笔在爬片上进行范围的圈定,将抗体加入划定区域,免疫组化笔中的疏水成分阻滞抗体溢出所圈定的范围,从而达到节约抗体的目的。细胞爬片是细胞培养中比较经常会用到的,现将自己操作的一些方法与技巧拿与大家分享。

  细胞爬片的步骤:

  1.将盖玻片用洗洁剂清洗干净,然后用自来水将洗洁剂冲干净,再用纯水冲洗三遍,泡在75%的酒精中静置10min。

  2.用镊子夹起24mm*24mm盖玻片在酒精灯上将酒精烧干,温度不可太高。

  3.将烧干的盖玻片放在六孔板中,待冷却后将细胞悬液(约1-2×104个细胞)滴加在盖玻片上。

  4.5h后轻轻补加1ml培养基,置37℃ 5%CO2 培养箱中培养过夜,细胞贴在玻片上良好生长。

  5.固定:

  (1)爬好的爬片用PBS溶液洗2遍,六孔板每孔里面加1ml 4%多聚甲醛溶液后,静置固定10-15分钟。(2)吸掉多余的4%多聚甲醛溶液,然后加入500ul的PBS溶液,4°保存运输。

  有的用甘油封片甘油或者中性树脂均可封片,多用于免疫组化;

  细胞爬片的特点

  1.玻片表面经过TC处理,双面均可使用。

  2.γ射线灭菌,保证无菌。

  3.使用便捷,只需打开包装,将爬片放入孔板内,将细胞悬液滴到爬片上即可培养。

  4.爬片厚度为0.17mm,直径为8mm/14mm/20mm/25mm.分别适用于48孔细胞培养板/24孔细胞培养板/12孔细胞培养板/6孔细胞培养板。

  5.超强吸附:该玻片表面具有永久的阳离子电荷,可以通过静电作用吸附冰冻切片组织或细胞,使之粘附在玻片上,进而在玻璃和切片组织之间形成共价键.因此,无需粘黏剂或者蛋白包被,该玻片也能牢固的粘附切片或细胞。


本文链接:https://www.zjby-biotech.com/news/hydt/813.html

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