尼式染色实验操作步骤（手把手教你做尼式染色实验）

2023-04-10 10:41:10

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　　尼氏染色法（Nissl Staining）是用碱性染料染神经组织的一种方法。尼氏体是胞质内的一种嗜碱性物质，广泛见于各种神经元，不同神经元中的尼氏体形状、大小和数量则各有差异。

　　实验原理

　　本次尼式染色实验采用甲苯胺蓝作为染料。甲苯胺蓝为碱性染料，其中的阳离子有染色作用，组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。

　　实验步骤

　　01、脱蜡至水：

　　二甲苯Ⅰ 15min

　　二甲苯Ⅱ 15min95%酒精 30s80%酒精 30s75%酒精 30s流水洗 30s

　　02、用免疫组化笔圈出待测组织

　　03、滴加甲苯胺蓝染液，室温染色45min（或置50℃~60℃烘箱染色10min）后，用水冲洗

　　04、用70%乙醇分化2分钟

　　05、分化后进行梯度脱水：

　　80%乙醇 2min95%乙醇 2min无水乙醇 4min

　　06、中性树胶封片

　　注：若分化不理想可退回70%酒精继续分化，但分化完全后请快速脱水，切勿分化过度，甲苯胺蓝法不可复染。

　　实验结果

　　软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。