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尼式染色实验操作步骤(手把手教你做尼式染色实验)

2023-04-10 10:41:10
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  尼氏染色法(Nissl Staining)是用碱性染料染神经组织的一种方法。尼氏体是胞质内的一种嗜碱性物质,广泛见于各种神经元,不同神经元中的尼氏体形状、大小和数量则各有差异。

  实验原理

  本次尼式染色实验采用甲苯胺蓝作为染料。甲苯胺蓝为碱性染料,其中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。

  实验步骤

  01、脱蜡至水:

  二甲苯Ⅰ 15min

  二甲苯Ⅱ 15min95%酒精 30s80%酒精 30s75%酒精 30s流水洗 30s

  02、用免疫组化笔圈出待测组织

  03、滴加甲苯胺蓝染液,室温染色45min(或置50℃~60℃烘箱染色10min)后,用水冲洗

  04、用70%乙醇分化2分钟

  05、分化后进行梯度脱水:

  80%乙醇 2min95%乙醇 2min无水乙醇 4min

  06、中性树胶封片

  注:若分化不理想可退回70%酒精继续分化,但分化完全后请快速脱水,切勿分化过度,甲苯胺蓝法不可复染。

  实验结果

  软骨、成骨细胞呈紫红色;背景呈淡蓝色。


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