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肺血栓模型实验操作步骤(手把手教你做肺血栓模型实验)

2023-04-11 10:22:32
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  肺血栓是体循环的血栓脱落阻塞肺动脉及其分支引起肺循环障碍的临床病理生理综合征。血栓是指血液发生凝固或血液中某些有形成分凝集形成的固体质块。

  实验原理

  本次实验采用体外血栓形成法,指在体外制备栓子,如血凝块、塑料微球、明胶微球、聚苯乙烯微球、玻璃球状物等等,将其注入体内,形成肺栓塞模型。

  实验步骤

  1、术前血栓制备:在造模前一天,自大鼠颈静脉取血2ml收集入无菌100ml培养皿中,室温凝固30min后,存放4℃冰箱过夜,第二天取出制备成直径0.6mm~0.8mm、长度1mm~2mm的血栓,无菌生理盐水反复冲洗后配置成血栓混悬液备用。

  2、麻醉,等待大鼠麻醉后,使大鼠仰卧于泡沫板上,固定四肢,用碘伏消毒。

  3、沿颈前正中线做长约1cm~1.5cm切口,钝性分离右颈总静脉,缓缓注入含制备血栓20个~25个的混悬液2ml。

  4、压迫止血,缝合切口,用碘伏消毒。

  5、术后正常饮水饮食。

  实验结果

  术后取材时间点为7天。

  术后大鼠具体表现:模型组大鼠在注入血栓后数分钟内出现明显缺氧表现,呼吸加深加快,口唇发紫,鼻翼煽动,约2h~3h后可自行缓解,但活动饮食均减少。

  模型大体判断标准:正常大鼠肺部呈现粉红色,表面光滑,未见任何病变;模型组大鼠大部分肺组织大体标本显示为肺组织表面不光滑,肺表面有局灶性出血、渗出及水肿,可见点片状出血点。血栓大部分呈多发性,病变呈双侧分布。

  显微镜下观察:模型组肺内均可见大量炎性细胞浸润和红细胞渗出,肺泡壁及间质增厚,肺泡腔内见少量红细胞和液体;肺泡间隔变宽、断裂,毛细血管扩张,肺泡萎陷、肺不张,出现肺损伤改变。


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