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分子实验-诊断自身免疫性疾病中的间接免疫荧光

2022-01-11 10:25:13
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  Lal PathLabs 博士在自身免疫性疾病领域提供了适当的临床相关性和诊断支持,并提供了一系列测试,这些测试涉及自身免疫性疾病发病机制中涉及的广泛抗体。

  概述 :

  系统性红斑狼疮包括绝大多数自身免疫性疾病,其临床特征范围广泛,从皮疹到关节相关症状(关节炎),再到更复杂的症状,如浆膜炎、肾脏疾病、神经系统和血液系统疾病(白细胞减少症)。

  在病程中,>98% 的患者的抗核抗体 (ANA) 呈阳性;重复的阴性测试表明诊断不是 SLE,除非存在其他自身抗体。针对双链 DNA 的高滴度 IgG 抗体和针对 Sm 抗原的抗体均对 SLE 具有特异性,因此,有利于在符合临床表现的情况下进行诊断。

  个体中存在多种没有临床症状的自身抗体不应被视为SLE 的诊断,尽管此类人的风险增加,因为大多数患者在自身抗体出现数年后才开始出现临床 SLE。

  抗核抗体 (ANA) 是一个术语,它描述了针对细胞核成分(包括 DNA、RNA 和各种核蛋白)的各种自身抗体。

  在风湿性疾病和 SLE 等结缔组织疾病患者中发现这些 ANA 的频率很高。ANA阳性与SLE高度相关,ANA阴性基本上排除了该病;然而,有时可能需要重复测试才能确定诊断。

  大鼠肝脏的冷冻切片历来是最流行的展示 ANA 的底物,但现在已被各种类型的细胞系所取代。我们 LPL 获得了由英国细胞培养公司生产的 HEp-2 细胞,用于报告各种 ANA 模式,临床医生发现这些模式在与特定自身免疫性疾病相关联方面非常有帮助,因为该过程快速且便宜。

  当用于 ANA 筛选时,HEp-2 细胞与大鼠组织相比表现出三个明显的优势,即它们是标准化的抗原底物,与啮齿动物组织相比,批次间的变异性更小;HEp-2 细胞较大,可以更轻松地观察细胞形态,从而提高对大鼠切片的检测灵敏度,最后,许多 HEp-2 细胞正在积极分裂,暴露在大鼠肝脏切片静息细胞中通常不表达的抗原。

  我们使用间接免疫荧光技术,其中患者血清和适当的对照与 HEp-2 底物一起孵育。经过反复洗涤并用荧光标记的偶联物标记,然后洗掉多余的;用荧光显微镜观察载玻片,以检测与抗体结合的 HEp-2 细胞区域相对应的特征性苹果绿荧光。

  ANA 筛查中 HEp-2 荧光模式的显微镜和临床解释的简要总结:

免疫荧光

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