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实验外包:HE染色是什么(HE的染色时应注意事项)

2021-11-11 09:41:14
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  HE染色是什么?

  苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。

  苏木精染液为碱性 ,主要使细胞和内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia ) 。

  HE的染色时应注意事项

  一张优质的HE染色切片,绝非仅指染色而言,它包括很多方面,首先应重视“固定”环节,其次注意脱水、透明、组织浸蜡,包埋和切片等各个步骤。一张因固定、脱水等步骤有所缺陷的切片,染色是不可能鲜艳、透明、层次分明的。解决上述各细节问题的方法已在前面各章节中均提到过。

  但在进行HE染色时还应注意以下问题:

  1.组织切片的脱蜡步骤应彻底,否则无论进行那种染色都会发生困难。脱蜡时间要充分,若溶蜡剂使用过久应及时更换以免效率降低,若室温过低,可将溶蜡剂置于温箱中进行脱蜡。

  2.苏木素染液使用一段时间后表面易出现亮晶状飘浮物,这可能是液体表面的过氧化物,必须过滤除去,以防沉渣污染组织切片。苏木素液一般染过三、四百张切片后,着色力会减弱,着色不鲜艳,呈灰蓝色时应及时更换新液。

he染色是什么

  3.染色的时间长短需依据:染剂对组织的染色作用,室温条件,切片厚薄,固定液的类别,染液的新旧而进行调节。所以在染色时必须使用显微镜观察染色程度以利掌握时间。

  4.分化十分重要。分化步骤的准确也是染色成败的关键,若分化失当则必然引起染色不匀或过淡,过深等现象,因此分化后一定要镜检,观察胞核是否清晰,胞浆呈淡白色。否则需再次分化,不然一旦复染后,组织会呈紫蓝色即“蓝盖红”现象。

  5.还原液不宜过浓,若碱性太强易使组织脱落故以淡为宜。

  6.伊红宜淡染,复染过深胞核会不清晰,影响镜检。

  7.若脱水,透明等步骤不够彻底,则组织表面会有一层雾状膜。若有这一现象,应立即更换纯酒精脱水,再次透明。在潮湿的季节里应注意酒精的浓度、若降低要及时更换。

  8.染色后的组织切片、要将组织四周的污染物痕迹擦掉,以免影响美观。

  9.封固剂要适量,滴加时应小心倾滴,盖玻片要轻轻放置,以免气泡产生影响镜检。盖玻片大小选择要合适,一般要大于组织块,以防封盖不全,盖玻片要放正,标签贴牢,编号清楚。从而保证切片的封藏和美观。

  10.染好的切片应妥为保存,更应避免日光照射,否则切片容易褪色。

  HE染色时细胞器分别是什么颜色?

  采用苏木精-伊红染色法也就是HE染色法的话,不能准确说出细胞器的颜色,实验记录或考试时只能说染色效果为:细胞核蓝色,胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。或者详细说明如下:细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。

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