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2022-04-29
重组蛋白的表达与纯化(获得可溶性天然蛋白质的三个关键参数)
如果你打算将目的蛋白应用于下游实验,那么成功表达重组蛋白是很重要的。如果一开始,你花点时间优化蛋白的可溶性,将会大大节约你后续纯化的时间。关于重组蛋白表达和纯化,可参考如下建议:标签中有什么?选择“正确”标签可能是一项艰巨的任务。理想的标签将帮助你获得可溶性蛋白,简化你的纯化方案,并且不
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2022-04-28
小鼠脾脏淋巴细胞悬液制备(小鼠脾脏淋巴细胞悬液制备)
小鼠脾脏淋巴细胞悬液制备(小鼠脾脏淋巴细胞悬液制备)材料RPMI-5 或DMEM-5 完全培养基新鲜分离的小鼠器官: ≤6 周龄的小鼠胸腺;6 周至6 个月龄的小鼠脾脏和淋巴结60mmX15mm 培养皿剪刀和镊子(保存在70%乙醇的烧杯中)装有19G 针头的6ml 注射器200μm 尼龙滤网步骤将新鲜分离的器官放
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2022-04-28
重组蛋白质的诱导表达、分离纯化、复性、冻干和定量
按操作手册进行,具体步骤如下。一、重组蛋白质的诱导表达1.挑取转化有质粒的单菌落,接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中,37 oC,250rpm/min 振摇培养过夜。2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10 ml(1:::20)选择性 LB 液体培养基中,37 oC,250 rpm/min 振摇培养至光密度(OD600=0.6)时,取
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2022-04-28
如何确定提取RNA的质量好坏,RNA提取实验方法技巧分析
各位都知道,提取到质量良好的RNA(包括总RNA和mRNA,以下同)是非常困难,关于RNA的提取技术,我就不说了,为什么呢?或许各位非常关心呢,我是这样想的,我可以看到的资料或者是厂家的说明书,各位也同样可以看到的,内容当然都是一样的了,所以实验做的好不好,主要是心的投入多少的问题,所以希望大家自己多多思考啊
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2022-04-28
佛手柑素(BM)或可被开发成预防骨质疏松症的食品成分或补充剂
骨质疏松症是最常见的骨骼疾病之一,严重影响老年人的健康和生活质量。成骨细胞分化和骨形成的减少导致骨量和微结构的变化,使骨骼容易发生骨折。佛手柑素(BM)是一种来自各种柑橘类水果的天然化合物,具有多种生物活性,包括抗脂肪生成的功能。2022年1月30日,发表于Food &Function的一篇题为Bergamottin p
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2022-04-27
细胞培养细胞贴壁生长现象(细胞不贴壁、生长缓慢是什么情况)
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,这些问题从细胞生长角度来说,针对细胞不贴壁、生长缓慢、生长不好,甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞不贴壁可能原因:●胰蛋白酶消化过度 ;●支原体污染 ;●培养基pH值过碱(NaHCO3分解);●细胞老化 ;●
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2022-04-27
流式细胞周期分析:DNA 染色及其他
虽然您可以使用免疫荧光观察有丝分裂细胞周期进程,但流式细胞术是描绘仅通过染色体形态不明显的细节的好工具。DNA 染色是了解您的细胞在做什么的好方法。您还可以使用许多其他染色剂来更准确地指出您的群体中所代表的细胞周期的确切阶段。在这里,我将绘制可用于细胞周期分析的可用染色剂的图片。大局:用于
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2022-04-27
如何通过 3 个简单的步骤销毁您的流式细胞术数据:Snap、Crackle 和 Pop
虽然许多科学家有条不紊和精确,但我们中的一些人喜欢生活在边缘。通读协议?不,谢谢,我会抓住机会猜猜我应该使用什么浓度的 HCl。用正确的内容标记我的试管?Puh-lease – 仅凭“感觉”来演绎更令人兴奋的事情。作为对我们这些在飞行中茁壮成长的人的敬意,这里有 3 种方法的汇编,你绝对可以破坏任何破译可靠流
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2022-04-27
RT-PCR实验反应体系优化方法详解汇总(rt pcr原理分析)
一、增加反应体系的灵敏度:1. 分离高质量RNA:成功的cDNA合成来自高质量的RNA。高质量的RNA至少应保证全长并且不含逆转录酶的抑制剂,如EDTA或SDS。RNA的质量决定了你能够转录到 cDNA上的序列信息量的最大值。一般的RNA纯化方法是使用异硫氰酸胍/酸性酚的一步法。为了防止痕量RNase的污染,从富含RNase的样品
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