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2022-10-24
软琼脂克隆形成实验操作过程
软琼脂克隆形成又名非锚定依赖性生长实验Anchorage-independent assay,利用软琼脂为培养介质,使细胞在悬浮状态下生长。某些恶性肿瘤细胞,不仅在贴壁状态下能增殖,在悬浮状态下也能增殖,进而通过软琼脂中形成克隆的能力反映了恶性程度,可用于细胞分化的基础研究和临床肿瘤治疗的疗效检验等方面。1. 具体过
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2022-10-23
细胞培养支原体污染表现,有什么检测方法
支原体是细胞培养中常见的污染,。因支原体属于直径介于0.2-2µm的最小原核生物,形态易变,所以即使用滤网给培养基过滤20次,它还会在已经感染的培养基中“阴魂不散”,而又因为它缺少细胞壁,没有这层外衣包裹之后的它,可以成功逃过大部分抗生素的“追杀”。在细胞培养液中,支原体可达到107-108CFU/mL(CFU=Colony
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2022-10-23
原代细胞与细胞系的区别(原代细胞与细胞系对比)
原代细胞生长缓慢,一般认为,原代细胞培养的第1代和传代到第10代以内统称为原代培养。原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了,细胞的生长会出现停滞,大部分细胞衰老死亡。但是有极少数的细胞能够度过“危机”而继续传下去,这些存活的细胞一般能够传到40-50代,这种传代细胞叫做细胞株。当细胞传至50代以后
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2022-10-22
细胞原代培养的基本步骤
细胞培养是研究病毒与研制疫苗的基础技术,因此细胞培养技术在遗传学、免疫学、肿瘤学、病毒学、分子生物学等领域已得到广泛的应用。近年来发展起来的核移植、细胞杂交、DNA介导的基因转移以及一些物理图谱的建立,也都需要与细胞培养紧密结合。细胞培养一般过程主要包括以下几点:1.准备工作:准备工作的内容包
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2022-10-22
原代细胞培养操作步骤(胰酶消化法与组织块直接培养法)
原理:将动物机体的所有组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置适宜的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程之为称原代细胞培养。原代细胞培养操作步骤(一)胰酶消化法1、器材:将孕鼠或新生小鼠拉颈椎致死,放入75%酒精泡2—3秒
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2022-10-21
细胞3D培养操作技术(3d细胞培养技术的应用)
体外三维细胞建模和成像是候选分子毒性评估的一个有价值的早期步骤,3D细胞培养很大程度上可检测临床前药物开发工作流程,包括在细胞、组织、器官和整个有机体的迭代更高生物水平上的毒性评估。在这些层次上建模和成像的能力是分子评估和发展的强大工具。3D细胞培养中的单个细胞提供了关于分子亚细胞对一般细胞功能
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2022-10-21
制作划痕实验需要注意些什么(6个小细节)
伤口愈合试验,也通常称为“划痕试验”,是一种广泛建立的研究体外集体细胞迁移的技术。细胞划痕(Wound Healing)是一种操作简单,经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。其实验原理是,当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域,称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区
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2022-10-21
做免疫组化的操作步骤和细节
免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemist
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2022-10-21
免疫组织化学技术介绍(原理、分类、优势分析)
一、免疫组织化学技术的基本原理应用免疫学和组织化学原理,对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位定性、定位或定量研究,称为免疫组织化学或免疫细胞化学。众所周知,抗体与抗原的结合具有高度的特异性。免疫组织化学就是利用这一特性,即先提取组织或细胞中的一些化学物质,然后作为抗原或半抗原免疫
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