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Transwell迁移/侵袭实验原理

【实验原理】Matrigel是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分，含有LN、IV型胶原、接触蛋白和肝素硫酸多糖，铺在无聚乙烯吡硌烷酮的聚碳酸酯滤膜上，能在DMEM培养基中重建形成膜结构，这种膜结构与天然基质膜结构极为相似。滤膜孔径一般为8um，而且膜孔都被Matrigel覆盖，细胞不能自由穿过，必须分泌水解酶，并通过变

原代细胞制备与培养实验原理及方法

实验原理将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理，分散成单细胞，置于合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。原代细胞保留了很多来源组织的重要生理特性，能高度模仿体内的情况，且没有遗传和化学的改变。因此，原代细胞成

提高电穿孔法转染的效率方法

电穿孔法难点在于提高电穿孔的效率。实验操作者一般能从电转仪厂家得到转染的详细方案和优化指导。当你需要自己优化转染效率时，可以从以下方面进行：1、外加电场的强度：电压过低，细胞膜不能形成小孔，使得外源分子通过；电压过高，细胞会受到不可逆损伤，以至于裂解。对于大部分哺乳细胞来说，电压250～500V/cm是

原代细胞培养方法有哪些（简单实用）

很多老师在设计科研实验的时候都会很迷茫，到底用什么细胞好？越来越多的老师开始倾向于原代细胞的科研实验，在设计实验中，原代细胞和细胞株到底该怎么选择呢？原代细胞的定义：原代细胞的培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。因此，较为严格地说是指成功传代之前的培养，此时的细胞保持原

真菌细菌污染的预防方法

请遵守细胞污染永恒定律：无论什么细胞只要是不重要的细胞污染了，立刻加84弃之，重新复苏新冻存管培养；实在需要挽救的请参考以下：细菌污染：主要有洋葱霍尔伯德菌型污染确定是非常珍贵的细胞建议分别配置含10倍庆大霉素和两性霉素溶液（G/A)的PBS和5倍庆大霉素和两性霉素溶液（G/A)的*培养基各一份。然后

细胞培养注意事项（4个点）

培养细胞的*培养基一般由基础培养基（如MEM）和添加剂（血清或细胞生长因子）组成，培养基的配方都会随着细胞需要的营养不断的改进，而抗生素也是，广谱抗生素使用太多，会导致细胞的耐受性提高，从而产生抗性，甚至有些老师为了实验的精确性，选择不用抗生素培养细胞。一、基础培养基绝大多数培养基是建立在

流式细胞仪技术是干什么的

流式细胞仪技术，主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光，经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点，当每个细胞经过焦点时，发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置)，光检测器把散射光定量转化成电信号，经数字转换器进行数

细胞培养中细胞不贴壁了怎么办

细胞贴壁原理大多数的哺乳动物细胞在体内和体外均附着于一定的底物而生长，在体外时这些底物可以是其他细胞、胶原、玻璃或塑料等。贴壁的过程：细胞首先分泌细胞外基质，这种细胞外基质黏附在支持物的表面（培养瓶，培养皿的底面）。然后，细胞通过其表面表达的黏附因子与这些细胞外基质结合。贴壁过程一些

qPCR实验中影响Cq值的相关因素

qPCR实验中许多因素会影响您的 C q 值。您的样品之间C q 值的一些差异将是由于生物事件，例如您的目标基因响应治疗而上调/下调。然而，C q 值同样容易受到 PCR 反应准备和 PCR 组分本身的影响。比较常见的是以下几种情况：1. 主混音溶液中的 pH 值和盐浓度会影响荧光发射。荧光发射的任何变化都会自然地改变

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