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2022-11-24
多组氨酸标签蛋白质纯化方法(附带步骤)
重组蛋白的表达和随后的蛋白质纯化被广泛用于生化研究。其中一些蛋白纯化方法涉及使用肽亲和标签,这些标签与目的蛋白质融合,并用于通过亲和层析加速蛋白质纯化。金属亲和层析法IMAC就是一种常用的蛋白纯化方法,它可用于快速纯化多组氨酸亲和标签蛋白,在一个纯化步骤中可实现 100 倍的富集。 IMAC甚至可以以高产率
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2022-11-24
紫外分光度法蛋白定量实验方法
蛋白定量是蛋白质检测过程中的重要环节,检测的方法有很多,有Bradford检测法、Bradford斑点试验法、Coomassie 斑点试验法、紫外分光度检测法。其中、紫外分光度法是蛋白质定量方法中比较快的一种方法。一、紫外分光光度法进行蛋白定量的检测原理:由于蛋白质分子对于不同光度波段的吸光率也有所不同,所以紫
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2022-11-24
免疫细胞抗原特异性的高通量检测方法
确定单个T细胞识别的多肽对理解和治疗免疫相关疾病非常重要。传统的流式细胞术的方法受限于荧光信号通路的限制,在一个样本中只能同时筛选10-100个不同的T细胞特异性,这种方法并不适用于高通量大规模的T细胞特异性检测。Immudex公司使用对MHC多聚体标记独特DNA条形码的技术将高通量筛选单个样本中的免疫细胞特异性变为
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2022-11-24
微胶囊保存微生物在培养连续性、储存和检索方面的优势
微生物应用技术在细胞工厂以及研究各种生物过程实验中起着重要作用,但是微生物的保存以及微生物培养的连续性一直是微生物应用领域的难题。实践证明,与在平板或发酵罐中连续传代培养微生物培养物相比,建立微生物库可以轻松实现微生物储存和检索。根据储存时间的长短和微生物的种类,一般会采用不同的保存方法。长
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2022-11-23
HEK293细胞瞬时转染技术,附常用的结果分析方法
HEK293细胞是新药开发研究的主要细胞,本文初步介绍了细胞的瞬时转染技术并常用的结果分析方法:HEK293T贴壁细胞瞬时转染:1. 使用 12.5 mL 培养基 将 HEK293T 细胞接种到 10 cm 板中,以在日培养后达到 70-80% 的融合度。2. 为了提高转染和生产过程中的细胞粘附,用无菌聚 L-赖氨酸0.01% (w/v),75–150 k
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2022-11-23
PCR的有哪些基本类型,附PCR实验中常见问题解决方法
PCR 或聚合酶链式反应是分子生物学中用于创建特定 DNA 片段的多个副本的技术。这项技术是由USA生物化学家 Kary Mullis 于 1983 年开发的。通过PCR仪进行PCR 使产生数百万份 DNA 小片段成为可能。所以PCR仪也是分子生物学和生物技术实验室常用于见的实验室设备。PCR的原理PCR 技术基于 DNA 的酶促复制。 在
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2022-11-23
紫外分光度法进行蛋白定量的实验方法
蛋白定量是蛋白质检测过程中的重要环节,检测的方法有很多,有Bradford检测法、Bradford斑点试验法、Coomassie 斑点试验法、紫外分光度检测法。其中、紫外分光度法是蛋白质定量方法中比较快的一种方法。一、紫外分光光度法进行蛋白定量的检测原理:由于蛋白质分子对于不同光度波段的吸光率也有所不同,所以紫
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2022-11-23
细胞培养怎么做,常见的细胞污染种类有哪些
您洗手了吗?您穿戴个人防护设备了吗?细胞培养应该怎么做?下面列出了几乎所有人都需要注意的细节,大家可以对照自己的操作和习惯进行检查!工作区域1.细胞培养通风橱设置是否正确?2.细胞培养通风橱所在区域有无气流和直接出入通道?3.工作台面是否整洁?4.是否仅仅放置了实验所需的
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2022-11-22
细胞转染常用方法(方法分析与比较)
原理:带正电的DEAE-葡聚糖与核酸带负电的磷酸骨架相互作用形成的复合物被细胞内吞。主要应用:瞬时转染特点:相对简便、重复比磷酸钙好,但对细胞有一定的毒副作用,转染时需除血清且一般只用于BSC-1,CV-1,COS细胞系。磷酸钙法原理:磷酸钙DNA复合物吸附细胞膜被细胞内吞。主要应用:稳定转染、瞬时
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