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2022-11-16
细胞不贴壁、生长缓慢是什么原因(附带解决方法)
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,这些问题从细胞生长角度来说,针对细胞不贴壁、生长缓慢、生长不好,甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞不贴壁可能原因:●胰蛋白酶消化过度 ;●支原体污染 ;●培养基pH值过碱(NaHCO3分解);●细胞老化 ;●
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2022-11-15
PCR技术的临床应用
单克隆抗体技术曾使免疫学理论与实践有了新的突破,近几年来PCR技术使分子生物学及相关学科发生了一次方法学的革命。在不到10年的时间内,在以下几个领域中PCR技术已具有实用价值,且其应用范围正在不断扩大中。1、遗传病的产前诊断用胎儿羊膜细胞,羊水或甚至母血可以检查胎儿的性别,这在与性染色体关联遗传病
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2022-11-15
DNA甲基化测序方法有哪些
随着高通量测序技术(NGS)技术的发展,使我们能够从全基因组水平来分析 5’甲基胞嘧啶及组蛋白修饰等事件,由此能够发现很多传统的基因组学研究所不能发现的东西,这就是所谓的“DNA 甲基化测序"!DNA 甲基化测序方法按原理可以分成三大类:1、重亚硫酸盐测序; 2、基于限制性内切酶的测序; 3
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2022-11-15
WB的免疫印迹实验操作步骤
WB,蛋白质印迹(Western blotting)又称免疫印迹(immunoblotting),是采用印迹技术将蛋白质转移到膜上,再根据抗原-抗体的特异性结合,检测复杂样品中的某种蛋白的方法,该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。实验原理WB实验是通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)将混合蛋白质样品分离后,利用特殊虹吸或电场
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2022-11-15
些挑选血清的细节分享,附带储存和使用血清方法
体外生长的细胞对微生物及一些有害有毒物质无任何抵抗力,挑选血清是一个很艰难的决定,有些血清可能前期养细胞没有看到多大的问题,但是养着养着细胞突然暴毙,之前我们一直以为是细胞或者培养基的问题 ,后来给血清做完质谱之后,发现血清里含有的生长激素竟然是人体可以承受的几倍;以下我们分享一些挑选血清的细节
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2022-11-14
什么是细胞迁移与侵袭,细胞迁移的过程盘点
细胞迁移也叫做细胞爬行,细胞移动或者细胞运动,是细胞在化学信号(如:趋化因子)的驱使下沿着浓度梯度从一个区域转移到另一区域的运动,是活细胞普遍存在的一种运动形式。细胞迁移在损伤修复,细胞分化,胚胎发育,肿瘤转移等生理病理过程中普遍存在。细胞侵袭与细胞迁移比较类似,但是“侵袭”需要细胞穿过胞外
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2022-11-14
细胞克隆形成实验原理
实验原理克隆形成实验是肿瘤细胞学研究中的一种常用技术,其原理是将细胞分离成单细胞悬液,在培养基上接种培养,根据集落形成数量和大小来检测细胞增殖能力和致瘤性。该实验可用来研究肿瘤细胞的增殖能力、侵袭性,探讨细胞对不同杀伤因素的敏感性。应用简介软琼脂克隆形成实验可用于:①细胞分化的基
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2022-11-14
Transwell迁移/侵袭实验原理
【实验原理】Matrigel是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分,含有LN、IV型胶原、接触蛋白和肝素硫酸多糖,铺在无聚乙烯吡硌烷酮的聚碳酸酯滤膜上,能在DMEM培养基中重建形成膜结构,这种膜结构与天然基质膜结构极为相似。滤膜孔径一般为8um,而且膜孔都被Matrigel覆盖,细胞不能自由穿过,必须分泌水解酶,并通过变
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2022-11-14
原代细胞制备与培养实验原理及方法
实验原理将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置于合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。原代细胞保留了很多来源组织的重要生理特性,能高度模仿体内的情况,且没有遗传和化学的改变。因此,原代细胞成
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