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细胞传代的时间如何把握,细胞传代一定要超过24 小时吗

发布时间:2023-07-08 10:26:50 阅读:11522次 来源:百度学术

  细胞传代/复苏做得不好,会导致状态不好、密度低、不均匀、状态差。传代一定要超过 24 小时吗?如果细胞状态好,密度大, 没到 24 小时就传代的话,会对细胞状态有影响么?

  「进阶」

  细胞传代注意事项

  除了把握传代时机,已如前述,在 80%~90% 汇合阶段最好,过早传代细胞产量少,过晚细胞健康状态不佳。还有很多其他变量,会影响细胞传代效率。

  1、消化时间要适度,消化时间过短细胞不易从瓶壁脱落,过长细胞可脱落流失。

  2、消化液浓度要适宜,过浓时消化作用强烈,细胞反应快,所需消化时间短,掌握不好,细胞易流失。

  3、各种细胞对消化反应不同,有的敏感,有的迟钝,因此应根据所用细胞特点制定适宜消化措施。有的细胞附着瓶壁不牢,用吸管可从瓶壁直接吹下来,但这样容易伤害细胞,细胞大片脱落掉,不易计数,应尽可能采用消化法分散细胞为妥。

  4、消化传代良好时,细胞受损害少,细胞悬液均匀,各分装样品中数量误差小,细胞生长增殖速度一致,实验结果可靠性大。

  5、无菌操作:细胞的整个培养过程中,无菌操作,包括操作前要洗手,进入超净台前要用 75% 酒精擦拭,试剂等瓶要 75% 酒精喷浴后才能放入超净台 。操作动作要准确敏捷,但又不能太快,以防空气流动,增加污染机会。不同细胞,不同操作之间需要换枪头,避免污染。


本文链接:https://www.zjby-biotech.com/news/hyzx/2513.html

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