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细胞培养实验中血清如何保存

2023-07-07 10:26:49
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  血清是细胞培养实验中不可或缺的重要试剂,它含有许多细胞生长所需的营养物质、生长因子和其他重要成分。为了确保血清的质量和稳定性,正确的保存方法非常重要。在本文中,我们将探讨血清保存的关键要点。

  血清的保存应该留意以下几点:

  (1)生物学实验中需求长时间保存的血清有必要储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超越1个月。因为血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,有必要预留必定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。

  (2)热灭活是指56℃,30分钟加热已完全冻住的血清。生物学实验中加热过程中须规则摇晃均匀。此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活。除非有必要,一般不主张作此热处理,因为热处理会构成血清堆积物显着增多,并且还会影响血清的质量。补体参与反应有:细胞毒作用,滑润肌细胞缩短,肥大细胞和血小板开释组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。

  (3)瓶装血清冻住需采用逐步冻住法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温,待悉数溶解后再分装。生物学实验中在溶解过程中需不断悄悄摇晃均匀(当心勿构成气泡),使温度与成分均一,减少堆积的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃冻住,这样因温度改动太大,简略构成蛋白质凝集而呈现堆积。

  (4)一般厂商供给的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清参与培养液内一同过滤,切勿直接过滤血清。

  (5)血清中的堆积物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及冻住后血清中纤维蛋白构成,这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理。显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,堆积物的构成会显着增多。有些堆积物在显微镜下调查象"小黑点",常误认为血清受污染。一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但假设怀疑血清质量,则应当即停止使用,替换另一批号的血清。

  (6)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,一同血清中的有效成分会破会而影响血清质量。


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