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细胞实验怎么算细胞量,最常用的细胞计数的方法是什么

2023-04-06 10:34:06
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  细胞计数就是从需要计数的细胞悬液中取一定量细胞进行计数,并通过计数得知原始细胞悬液中的细胞密度以及细胞总和数.在细胞计数时,若细胞浓度太高,可进行必要的稀释.常用的细胞计数有细胞电子记数仪计数法和细胞板计数法,但电子计数仪记数法在许多实验室尚未完全推广,细胞板计数法仍是实验室目前常用的方法.

  1.制备鸡红细胞悬液:取50ml小烧杯一只,以一份鸡血加十份0.17mol/L氯

  化钠溶液稀释,形成一种不透明的红色液体,此为鸡红血细胞悬液.悬液制备后应轻轻反复吹打, 使细胞充分分散.

  2.准备记数板:用酒精清洁鸡血细胞悬液及专用盖玻片,再用绸布擦净.

  3.加样: 细胞记数板盖上专用盖玻片,用无菌细口吸管吸取一滴鸡血细胞悬

  液,从记数板上盖玻片的边缘一侧缓缓滴入,使之充满记数板和盖玻片之间的的空隙中,注意:加样量不要过多溢出盖玻片,也不要过少或带有气泡.不理想时要重新加样,否则会影响细胞计数结果.

  4.计数:稍候片刻,将计数板放在低倍镜下观察计数.计算出计数板的四角大方格(每个大方格又分16个小方格)内的细胞数.计数时,只计数完整的细胞,若聚成一团的细胞 则按一个细胞计数.在一个大方格中,如果有细胞位于线上,一般计上限细胞不计下限细胞,计左线细胞不计右线细胞.

  5.计算:计完数后,需换算出每mol悬液中的细胞数.由于计数板中每一方格的面积为0.1cm2 ,高为0.01cm,这样它的体积为0.0001cm3 即0.1mm 3 .由于1ml=1000 mm 3 ,所以每一大方格内细胞数×104=细胞数/ ml,故可按下式计算:

  细胞悬液细胞数/ ml=4个大方格总数/4×104.如计算前已稀释,可再乘稀释倍数.

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