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大小鼠水迷宫实验操作方法

2023-03-04 10:24:42
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  Morris水迷宫(Morriswatermaze,MWM)实验是一种强迫实验动物(大鼠、小鼠)游泳,学习寻找隐藏在水中平台的一种实验,Morris水迷宫主要用于测试实验动物对空间位置感和方向感(空间定位)的学习记忆能力,被广泛应用于学习记忆、老年痴呆、海马/外海马研究、智力与衰老、新药开发/筛选/评价、药理学、毒理学、预防医学、神经生物学、动物心理学及行为生物学等多个学科的科学研究和计算机辅助教学等领域,在世界上已经得到广泛地认可,是医学院校开展行为学研究尤其是学习与记忆研究的首选经典实验。

  在介绍实验步骤之前,我们需要先了解下水迷宫实验的两大要素,驱动力和考核内容。水迷宫的驱动力是小鼠本能对水环境的厌恶,这就会驱使小鼠想尽快离开这个环境,其中略低于水面的平台就可以让小鼠基本达成逃离水环境的目标,因此小鼠有动力尽快找到这个平台;而考核内容则是分析小鼠是不是能够尽快学会用周围的提示物(Cues)为线索找到水下平台,绝大多数的水迷宫实验主要(但不限于)以下三个部分:

  1、平台可见期实验(2days)

   2、平台隐藏期训练(5day) 

  3、无平台期检测(1day)

图例

图一:标准水迷宫实验日期表(不含适应环境期)

  实验需要用到的仪器: 系统由水迷宫水池、摄像系统以及Xeye动物行为轨迹分析系统组成。

  实验方法;

  1. 获得性训练

  (1)将动物(大鼠或小鼠)头朝池壁放入水中,放入位置随机取东、西、南、北四个起始位置之一。记录动物找到水下平台的时间(s)。在前几次训练中,如果这个时间超过60s,则引导动物到平台。让动物在平台上停留10s.

  (2)将动物移开、擦干。必要时将动物(尤其是大鼠)放在150W的白炽灯下烤5min,放回笼内。每只动物每天训练4次,两次训练之间间隔15~20min,连续训练5d。

  2. 探查训练

  最后一次获得性训练结束后的第二天,将平台撤除,开始60s的探查训练。将动物由原先平台象限的对侧放入水中。记录动物在目标象限(原先放置平台的象限)所花的时间和进入该象限的次数,以此作为空间记忆的检测指标。

  3. 对位训练

  测定动物的工作记忆(workingmemory)。探查训练结束后的第二天,开始维持4天的对位训练。将平台放在原先平台所在象限的对侧象限,方法与获得性训练相同。每天训练4次。每次记录找到平台的时间和游泳距离以及游泳速度。

  4. 对位探查训练

  最后一次对位训练的第二天进行。方法与上述探查训练类似。记录动物60s内动物在目标象限(平台第二次所在区)所花时间和进入该区的次数。

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