慢病毒储存与稀释方法及步骤

2023-03-02 10:38:33

访问量：116442

　　慢病毒是一种常用的基因递送工具，通常需要在实验室中储存和稀释。以下是慢病毒储存和稀释的方法和步骤：

　　储存慢病毒：

　　1、收集慢病毒的培养基，如DMEM等。

　　2、收集已经产生慢病毒的细胞培养物。

　　3、离心细胞培养物，使病毒沉淀在细胞上清液中。

　　4、将上清液收集到新的离心管中，并加入适量的冷冻保存液，如DMSO或甘油。

　　5、将管子放在冰上，缓慢冷冻，最好是放在-80℃的冰箱中进行长期储存。

　　稀释慢病毒：

　　1、取出冰箱中的储存慢病毒管子，快速解冻，可放在37℃的水浴中进行解冻。

　　2、加入适量的无血清培养基，通常是DMEM，使其稀释到所需的浓度。

　　3、在生物安全柜内进行，将溶液转移到新的离心管中，并通过低速离心去除残留的细胞碎片和细胞垃圾。

　　4、将慢病毒稀释液保存在-80℃的冰箱中，避免多次冻融。

　　需要注意的是，在进行慢病毒的储存和稀释时，应当注意生物安全，避免污染其他样品和环境。在操作时应佩戴手套、口罩等个人防护用品，同时保证实验室内的卫生和清洁。