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慢病毒储存与稀释方法及步骤

2023-03-02 10:38:33
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  慢病毒是一种常用的基因递送工具,通常需要在实验室中储存和稀释。以下是慢病毒储存和稀释的方法和步骤:

  储存慢病毒:

  1、收集慢病毒的培养基,如DMEM等。

  2、收集已经产生慢病毒的细胞培养物。

  3、离心细胞培养物,使病毒沉淀在细胞上清液中。

  4、将上清液收集到新的离心管中,并加入适量的冷冻保存液,如DMSO或甘油。

  5、将管子放在冰上,缓慢冷冻,最好是放在-80℃的冰箱中进行长期储存。

  稀释慢病毒:

  1、取出冰箱中的储存慢病毒管子,快速解冻,可放在37℃的水浴中进行解冻。

  2、加入适量的无血清培养基,通常是DMEM,使其稀释到所需的浓度。

  3、在生物安全柜内进行,将溶液转移到新的离心管中,并通过低速离心去除残留的细胞碎片和细胞垃圾。

  4、将慢病毒稀释液保存在-80℃的冰箱中,避免多次冻融。

  需要注意的是,在进行慢病毒的储存和稀释时,应当注意生物安全,避免污染其他样品和环境。在操作时应佩戴手套、口罩等个人防护用品,同时保证实验室内的卫生和清洁。


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