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如何构建小鼠脓毒症模型(小鼠脓毒症模型构建方法)

2023-02-28 10:46:06
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  小鼠脓毒症模型是一种常用的动物模型,用于研究脓毒症的病理生理机制和新型治疗方法。以下是一般的小鼠脓毒症模型构建方法:

  实验动物选择:选择具有相似体重和年龄的小鼠进行实验,如C57BL/6小鼠、BALB/c小鼠等。

  制备细菌悬液:选择一种具有高度致病性的细菌,如大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)等,制备其悬液。常见的制备方法包括在培养基中培养至对数生长期,然后用PBS缓冲液洗涤、离心,最后用PBS缓冲液调节至适当浓度。

  注射细菌悬液:将制备好的细菌悬液用注射器注射到小鼠的腹腔内。注射剂量通常为小鼠体重的一定比例,如10^7CFU/g。

  观察小鼠症状:注射后观察小鼠的症状,如体温升高、呼吸急促、行动迟缓等,以确定是否成功构建脓毒症模型。

  处理小鼠:将小鼠随机分组,并进行不同的处理,如给予药物、营养支持等,观察其对脓毒症的影响。

  需要注意的是,小鼠脓毒症模型的构建应该在符合动物福利和伦理要求的情况下进行,避免对动物造成过多伤害。

  实验目的: 建立小鼠脓毒症模型并进行评价,为研究脓毒症致病机制和开发抗炎药物提供模型动物。

  实验方法: 采用盲肠结扎穿孔法(cecal ligation and puncture,CLP)诱导小鼠脓毒症,通过动物生存、术后小鼠载菌量、血常规和血生化指标、细胞因子水平、组织病理变化等方面对模型进行评价。

  实验结果: 小鼠的死亡率与盲肠结扎部位密切相关,盲肠结扎50%小鼠12 d存活率在40%左右,结扎75%小鼠4 d全部死亡(P<0.01)。与假手术组相比,50%结扎CLP小鼠血液和腹腔中载菌量增加,白细胞下降,差异有显著性(P<0.001)。CLP小鼠肝转氨酶ALT、AST和血清尿素氮BUN水平升高,差异具有显著性(P<0.01),炎症因子IL1α、IL6、IL10、MIP1α、MIP1β、TNFα水平升高。手术后48 h小鼠的肝和肺出现明显组织病理损伤。

  实验结论: 小鼠CLP模型具有典型的脓毒症病理特征,为后期研究抗炎药物的筛选提供了较好的动物模型。


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