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蛋白质纯度分析的作用及方法

2023-01-09 10:23:51
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  蛋白质纯度分析是判断蛋白质样品的纯度的重要手段。蛋白质纯度的高低直接影响到蛋白质的生物活性和生物学研究的准确性。因此,蛋白质纯度分析有如下作用:

  1、确定蛋白质样品的纯度:蛋白质纯度高的样品可以得到更准确的科学研究结果。

  2、检测蛋白质中杂质的存在:蛋白质样品中的杂质可能会影响蛋白质的生物活性,因此需要通过蛋白质纯度分析来检测和排除杂质。

  3、确定蛋白质的分子量:蛋白质的分子量是其重要的物理性质之一,是蛋白质的质量分析的重要参数。蛋白质纯度分析可以帮助确定蛋白质的分子量范围。

  4、检测蛋白质的稳定性:蛋白质纯度分析可以帮助检测蛋白质在不同条件下的稳定性。

  5、评价蛋白质的生产工艺:蛋白质纯度分析可以帮助评价蛋白质的生产工艺是否合理,从而指导工艺的改进。

  蛋白质纯度分析常用的方法有:

  1、含氮量测定法:测定样品中含氮的总量,由于蛋白质的分子量中约有16%的氮,所以可以用含氮量来反映样品中蛋白质的含量。

  2、分析琼脂糖凝胶电泳(SDS-PAGE):根据分子量不同,蛋白质在琼脂糖凝胶中的迁移距离也不同,可以通过与标准蛋白质比较来确定样品中蛋白质的分子量范围。

  3、蛋白质浓度测定:常用的浓度测定方法有UV吸收法、浊度法和Bradford 蛋白质浓度测定法。

  4、透射电子显微镜(TEM):蛋白质纯度高的样品,透射电镜下显微结构较为简单,呈现出单分子层的结构。

  5、近红外光谱(NIR):利用蛋白质的结构特征对样品进行分析,可以快速准确测定蛋白质的浓度和纯度。


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