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细胞实验:常见细胞培养的三种方式

2021-08-26 02:32:41
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  1885年,W Roux尝试使组织离体培养,被认为是组织细胞培养技术的萌芽;1907年Harrison和1912年Carrel开始把组织培养作为一种方法,用于研究离体动物细胞的培养,标志着细胞培养技术(Cell culture technology)的诞生。本文威正翔禹/缔一生物为您分析常见细胞培养的三种方式。

  细胞培养是指从体内组织取出细胞膜,模拟体内生存环境,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使其生长繁殖并维持结构和功能的一种培养技术。目前细胞培养方式主要包括以下三种:

  6.1 贴壁培养

  贴壁培养主要适用于贴壁依赖性细胞。此类需要相互依赖,需贴附于不起化学作用的物质(玻璃或塑料等无活性物质)的表面生长、生存和维持,并最终在附着面生长至单层,铺满平面时便会发生接触抑制。大多数动物细胞,包括非淋巴组织的细胞和许多异倍体体系的细胞属于这一类型,他们需要附着于适量正电荷的固体或半固体的表面胜仗。

  6.2 悬浮培养

  来源于血液、淋巴组织的细胞,及许多肿瘤细胞(包括杂交瘤细胞)和某些转化细胞等属于悬浮培养型细胞,细胞为非贴壁依赖性细胞,无需支撑面,细胞或细胞聚集体悬浮于液体培养基中增殖。悬浮培养是大规模细胞培养的理想方式,可采用类似于微生物的方法进行悬浮培养。

  6.3 固定化培养

  动物细胞较微生物脆弱,易受剪切力等的影响,而细胞固定化技术可较好的保护细胞免受机械力及环境变化的影响,提高细胞的耐受力,促使细胞高密度培养,提高目的产物的产率。在传统的固定化酶技术中,常采用戊二醛、聚丙烯酰胺、聚氨酯等作为固定化细胞载体。但在动物细胞培养中,一般使用较温和的固定方法,如吸附、包埋、中空纤维或胶囊化等,具有剪切力低、传递效果好和抗污染能力强、细胞生长密度高、产物易于收集和分离纯化等特点。

  由于所培养的细胞的不同,固定化培养的方式也有不同,一般对于贴壁依赖性细胞通常采用胶原包埋,而对于非贴壁依赖性细胞则常用海藻酸钙包埋。常用的细胞固定化的方法主要有吸附、共价贴附、离子/共价交联、包埋和微囊化等。

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