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悬浮细胞克隆的分离

2022-10-13 10:28:16
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  简介

  用加样枪或Pasteur吸管吸取集落,移至培养瓶或多孔板的培养孔中。

  操作方法

  悬浮细胞克隆的分离

  原理

  用加样枪或Pasteur吸管吸取集落,移至培养瓶或多孔板的培养孔中。

  材料与仪器

  生长培养基多孔板培养瓶解剖显微镜移液器粗头笔黄色枪头

  步骤

  用倒置显微镜观察培养皿中的细胞,用毡制粗头笔或Nikon标记笔标记出集落。

  2.24孔板的每一孔中加1 ml培养基。

  3.解剖显微镜(20~50×放大)下挑取集落

  (a)每一个细胞集落用一个枪头(加样枪上的黄色枪头)。

  (b)将移液器调至100μl。

  (c)先用枪头吸大约50μl的培养基,将该枪头对准要分离的集落,在集落内轻轻吸取剩余的50μl。

  4.将吸取物移至24孔板,用培养基冲洗集落,如果培养基中含美希索,集落就会固定、黏附,然后生长;如果培养基含有琼脂,则需用吸管在培养孔内上下吹吸集落几次,分散琼脂。细胞克隆也可以直接移至竖直放置的25 cm2的塑料培养瓶中。

图例

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