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蛋白抽提实验基本操作步骤

2022-09-21 10:22:10
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蛋白抽提实验基本操作步骤

  1、蛋白抽提实验介绍

  蛋白质的抽提实验是进行蛋白质实验分析的基本操作,可用于(1)蛋白质的分离(2)蛋白质功能结构检测(3)蛋白质表达前的基本操作。

  蛋白质在细菌中表现后,以反复的冷冻-解冻方法打破细胞,再用硫酸铵把蛋白质沉淀下来,此步骤可以去除大部份核酸、多醣、脂质等杂物。

  2、蛋白抽提实验注意事项

  1. 操作时总是小体积小量的操作,避免污染,并且动作要快。

  2. 蛋白酶普遍存在,在提取蛋白质的步骤中,早些抑制,经常抑制。

  3. 分装蛋白溶液,储存于不同的温度和不同的缓冲液中,测蛋白活性,找出最适储存条件。

  4. 冷藏,并加入稳定剂。这些稳定剂一般都能充分保持蛋白的生物学活性。

  5. 避免酶的反复冻融,如果酶需要冻存,分装成小管后冻存。


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