蛋白抽提实验基本操作步骤

2022-09-21 10:22:10

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蛋白抽提实验基本操作步骤

　　1、蛋白抽提实验介绍

　　蛋白质的抽提实验是进行蛋白质实验分析的基本操作，可用于（1）蛋白质的分离（2）蛋白质功能结构检测（3）蛋白质表达前的基本操作。

　　蛋白质在细菌中表现后，以反复的冷冻-解冻方法打破细胞，再用硫酸铵把蛋白质沉淀下来，此步骤可以去除大部份核酸、多醣、脂质等杂物。

　　2、蛋白抽提实验注意事项

　　1. 操作时总是小体积小量的操作，避免污染，并且动作要快。

　　2. 蛋白酶普遍存在，在提取蛋白质的步骤中，早些抑制，经常抑制。

　　3. 分装蛋白溶液，储存于不同的温度和不同的缓冲液中，测蛋白活性，找出最适储存条件。

　　4. 冷藏，并加入稳定剂。这些稳定剂一般都能充分保持蛋白的生物学活性。

　　5. 避免酶的反复冻融，如果酶需要冻存，分装成小管后冻存。