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细胞被支原体污染有什么危害,怎么处理

2022-09-14 10:33:04
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  在细胞培养过程中,支原体感染发生率达到63%,因而细胞培养过程中被支原体污染是一个世界性的难题。当细胞(特别是传代细胞)被支原体污染后,细胞内的DNA、RNA及蛋白表达发生改变,而细胞的生长率一般并未发生显著的影响,因而细胞被支原体污染一般难以察觉。

  支原体污染普遍存在,据美国数据统计,细胞发生支原体污染的几率在70%以上。同时,由于支原体直径很小,仅在180nm~350nm之间,只有通过电镜才能看到,不易被实验者肉眼发觉,支原体污染逐渐成为一个普遍存在的问题。本文缔一生物为您分析细胞培养:关于支原体污染的危害

  支原体污染的危害

  支原体污染是个循序的过程,普通抗生素对其无效。因此,支原体污染有多烦人,相信实验人都领教过了。

  1、细胞状态不佳,生长速度慢,实验无法推进。

  2、细胞内DNA、RNA及蛋白表达发生改变,影响实验结果,导致实验数据不准确,时间、经费的浪费。

  一株污染的细胞成为实验室的污染源,对工作区域以及培养箱和液氮罐造成污染,进而污染其他细胞,导致其他细胞继发性污染,实验受影响,数据无法重复,预期结果出不来。

  实验者可选用对支原体特效的抑制剂,通过对细胞的前期处理,中期加药,逐步通过4代左右的培养,从而将支原体污染彻底清除,确保试验顺利推进,结果准确。全世界此类试剂众多,北京缔一生物周围的实验人做过很多尝试,其中效果最确切且性价比很高的当属德国Minerva公司的ZellShield支原体祛除剂。

图例

  预防及处理

  组织细胞培养工作中,可以从以下几方面来预防支原体的污染:

  控制环境污染;严格实验操作;细胞培养基和器材要保证无菌;在细胞培养基中加入适量的抗生素。

  当细胞被支原体污染后若由于材料的特殊性必须保留可以采用一定的抗生素进行处理,对支原体最有抑制活性抗生素是四环素类、大环内酯类等。目前,市场上已有了新一代支原体抗生素M-Plasmocin,能有效的杀灭支原体,又不影响细胞本身的代谢,而且处理过的细胞不会重新感染支原体。另外,配合支原体检测试剂盒可以帮助尽快发现支原体的污染。

  后果

  细胞株若受到细菌、真菌、支原体、或是特定病毒等之污染时,会严重的影响实验的结果。而细菌、真菌等之微生物污染时,较易自培养基等的外观变化察觉。但是若受到支原体之污染时,细胞之外观较无明显变化,但是其污染会造成细胞之生长速率缓慢、细胞产生病变之型态改变等等变化。


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