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科研实验外包:如何选择培养基

发布时间:2021-08-16 03:10:36 阅读:19232次 来源:本站

  常见的培养基:MEM(minimum essential media)培养基

  含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺,8种维生素及必要的无机盐,成分简单,易于添加某种特殊成分适应某些特殊细胞的培养。DMEM( Dulbecco’s modified Eagle medium)培养基是由Dulbecco等人在MEM培养基的基础上研制而成。相比MEM增加了各成分的用量。分高糖型和低糖型,各自葡萄糖含量为4500g/L、1000g/L。高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长,适合于生长较快、附着较困难的肿瘤细胞。

  IMDM(Iscove’s modified Dulbecco’s medium)培养基含有42种成分,较DMEM增加了许多非必须氨基酸及一些维生素,增加了HEPES,葡萄糖含量为高糖型。适合于细胞密度较低、细胞生长较困难的情况,如白细胞融合之后杂交细胞的筛选培养,DNA转染后转化细胞的筛选培养。

  RPMI1640其成分较为简单,适合于许多种类细胞的生长,如肿瘤细胞或正常细胞、原代培养或传代培养的细胞。RPMI1640是目前应用最为广泛的培养基之一。HamF10、HamG12特点是在配方中加入了一些微量元素和无机离子,可以在加入很少血清的情况下使用,特别适合于进行单细胞分离培养。 HamG12培养基也是无血清培养基中常用的基础培养基。

  McCoy’s 5A

  McCoy’s 5A培养基是McCoy T.A等人在1959年研制成功的,是一种专门为肉瘤细胞设计的培养基,后来发现它特别适合于原代细胞培养,适合于较难培养的细胞的生长。

  如何选择培养基?

  没有固定标准,以下为参考:

  1、建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。着可以参考文献,或在购买细胞株时咨询。

  2、实验室惯用的培养基不妨试一试,许多培养基可以适合于多种细胞。

  3、根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选择RPMI1640;进行细胞杂交、基因转移实验,可选择IMDM。

  4、用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择最佳培养基,这是最客观的方法,但比较繁琐。

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