细胞是试验的基础，好的细胞是成功的开始，然而在养细胞的时候，我们总是遇到各种各样的问题，这里说下细胞出现空泡化的原因及解决方案！

　　1）细胞老化

　　原代细胞培养的过程中经常出现这样的情况，是有些细胞处于终末分化状态，不会再分裂，时间长了就会空泡化而死亡。

　　传代细胞出现这种状况比较少见，出现的原因一般都是因为细胞传代次数过多，老化严重。

　　2）PH值

　　培养液的PH值与细胞正常所需PH值差别太大。

　　3）胰酶消化

　　胰酶消化时间过长，会导致细胞状态受损，有时也会出现这种情况。除此之外，如果消化细胞吹打时力度过大，产生太多气泡，长期存在也会出现这种现象。

　　4）自噬

　　细胞缺乏营养导致饥饿诱导形成自噬也会形成空泡化，但是这种空泡在光学显微镜下是看不到的，只有在电镜下才能观察到。

　　5）细胞代谢

　　在细胞培养过程中，由于血清浓度不够、药物作用、外界刺激等情况下导致细胞代谢出现问题，内质网应激状况下会出现细胞空泡化的情况。

　　6）污染

　　衣原体感染：一旦一些细胞出现空泡化，继续培养，空泡范围会扩大，即使传代后也如此，出现这种情况，细胞基本无法挽救。后来检测发现，此种细胞存在衣原体的感染。

　　支原体污染：支原体污染在不严重的时候细胞是没有什么明显症状的，而且也无法通过光学显微镜观察到，只有在严重的时候会导致细胞状态变差，出现细胞空泡化的现象，细胞膜上也会出现小黑点附着。

　　病毒污染：在文献上也有说病毒污染也会导致细胞出现空泡化的情况。

　　遇到细胞空泡化我们应该如何解决？

　　1）如果是因为细胞老化的原因，可以通过复苏代数靠前的细胞进行培养。

　　2）如果是培养液PH的问题，可以通过更换培养液调整到合适的PH值，再进行培养。

　　3）在传代时，要选用合适浓度的胰酶和选取适当的消化时间进行消化，在操作时避免吹打太过用力出现太多气泡。

　　4）要保证细胞培养所需的营养充足，可以通过增加血清浓度和在培养基中加入谷氨酰氨解决。

　　5）尽量使用质量好和渠道正规的胎牛血清，因为这样的血清营养丰富且外源刺激因子少，可以有效的避免出现这类问题。

　　6）在细胞培养时要严格进行无菌操作，操作时要规范，减少污染的可能性。可以通过试剂盒检测细胞是否污染，对于已经污染的细胞灭菌