活细胞的识别在生物学和医学上具有重要意义。在细胞培养过程中，应随时记录细胞的生长情况，并经常测量细胞的存活率。在肿瘤细胞的研究中，为了测试各种药物对肿瘤细胞的杀伤力，还需要测量肿瘤细胞的存活率。在临床医学中，死细胞和活细胞的识别也被广泛使用。例如，为了测试男性的生育能力，精子细胞的活力是一种常见的方法。

　　鉴定细胞存活的方法有很多，包括染色和仪器分析。染色法是鉴定细胞活性的常用方法，简单易行。而直接形态学观察用于鉴别细胞是活还是死，实验结果容易受操作者主观因素影响，存在一定误差。因此，在实际操作中经常使用一些仪器来进行准确的批量检测。

　　识别死细胞和活细胞的不同方法有其特定的反应机制，但无论采用何种方法，它们都利用了死细胞和活细胞在生理功能和性质上的差异。

　　常用的方法有染色法和仪器分析法。

　　1 染色法

　　染色法分化学染色法和荧光染色法，根据染色机理的不同，染料或使死细胞着色，或使活细胞着色。死活细胞在生理机能和性质上的差异主要包括：

　　活细胞和死细胞的细胞膜通透性差异:活细胞的细胞膜是选择性膜，对细胞起保护和屏障作用，只允许物质选择性通过；但细胞死亡后，细胞膜受损，通透性增加。台盼蓝常用于鉴别细胞的生死，就是利用了这一特性。台盼蓝又称锥蓝，是一种阴离子染料，不能穿透完整的细胞膜。所以台盼蓝染色后只能染色死细胞，活细胞不染色。甲基蓝也有类似的染色机理。细胞壁分离也可以鉴定植物的存活。

　　酵母细胞的生死代谢差异:是亚甲蓝染料鉴定酵母细胞生死的依据。美蓝是一种无毒染料，其氧化形式为蓝色，还原形式为无色。由于在活细胞中代谢，细胞具有很强的还原能力，可以将亚甲基蓝由蓝色氧化变为无色还原，所以染有亚甲基蓝的活酵母细胞是无色的。而死细胞或代谢缓慢的老细胞，由于其非还原能力或还原能力极弱，使亚甲蓝处于氧化状态，从而被染成蓝色或浅蓝色。

　　荧光素二乙酸酯(FDA)是一种常用的染料，用于鉴定植物和动物细胞以及植物细胞原生质体的存活力。它的染色机理也是利用了活细胞和死细胞的代谢差异:FDA本身不产生荧光，非极性，可以自由地穿入和穿出完整的细胞膜。当FDA进入活细胞后，在细胞内被脂肪酶分解产生一种极性荧光物质——荧光素，它不能自由穿透活细胞膜并在其中积累，从而使活细胞产生绿色荧光；不活跃的细胞不能产生荧光，因为它们不能分解FDA。

　　此外，还有一些细胞器的专有染料。例如液泡染料中性红。中性红是一种低毒染料，能使活细胞空泡红色，而细胞质和细胞核不着色。死亡细胞的液泡不染色或淡染，染料分散在整个细胞中，细胞核和细胞质被染成红色。有时为了增加染色效果，可以将两种染料混合使用，如甲基蓝-中性红混合染色。

　　2 仪器分析法

　　可采用微电极技术（利用死活细胞膜两侧电位的差异）、全自动分析细胞记数仪和流式细胞仪等，可对细胞的死活进行精确的批量检测。

　　德国INNOVATIS公司生产的全自动Cedex细胞存活率/细胞计数器/细胞分析仪是世界上第一台高分辨率、高清晰度扫描(专利)细胞分析仪。拥有全自动台盼蓝染色、显微CCD成像和CEDEX工作站软件，可用于制药、医疗、发酵、免疫、病理、毒性检验、生物技术等学科的研发和工业生产中的细胞计数与分析。自动分析结果、检测分析数据输出(11项):细胞总数、细胞总浓度(细胞/ml)；活细胞数和活细胞浓度(细胞/毫升)；死亡细胞的数量和浓度(细胞/毫升)；细胞存活率(%)；细胞的平均圆度；细胞的平均直径(μm)；总速率)；的细胞；细胞直径直方图；聚类直方图(聚集直方图)；细胞圆度直方图；细胞生长时间图(培养时间图)。

　　流式细胞仪常用的判断细胞生死的荧光探针有两类:一类是能通过活细胞膜进入细胞并发出荧光的物质。比如FDA可以被活细胞保留，发出黄绿色荧光，但如果细胞受损，就会从细胞中丢失，观察不到荧光。另一类不能穿透活细胞膜，但能对固定细胞和膜受损细胞的细胞核进行染色。例如，碘化丙锭(PI)和EB、溴化乙锭(EB)通常用作第二类荧光探针。碘化丙啶(PI)不能穿透细胞膜，不能对细胞膜完整的正常细胞或凋亡细胞进行染色。对于坏死细胞，细胞膜的完整性丧失，碘化丙锭(PI)可以对坏死细胞进行染色。目前，常用的细胞凋亡和坏死检测试剂盒含有Hoechst 33342和碘化丙锭(PI)两种荧光染料。当凋亡发生时，染色质会收缩，Hoechst 33342可以穿透细胞膜。染色后，凋亡细胞的荧光与正常细胞相比会明显增强。上述两种染料双重染色后，正常细胞呈弱红色荧光+弱蓝色荧光，凋亡细胞呈弱红色荧光+强蓝色荧光，坏死细胞呈强红色荧光+强蓝色荧光。

　　另外，植物细胞的质壁分离试验可以用来见证植物细胞的存活，通过观察细胞质的流动性可以鉴定细胞的存活。