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新手如何进行外泌体检测(外泌体检测方法)

2022-05-04 10:37:28
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  外泌体(Exosomes)是细胞分泌到胞外的一种囊泡(Extracellular Vesicles,EVs),其大小为30-150nm,具有双层膜结构和茶托状形态,含有丰富的内含物(包括核酸、蛋白和脂质等),参与细胞间的分子传递。

  一、外泌体研究分析

  1、外泌体和肿瘤干细胞

  肿瘤干细胞(CSCs),又叫肿瘤起始细胞,能够介导肿瘤的复发和转移。

外泌体检测

特性:

  自我更新能力;无限增殖能力;对肿瘤治疗(如化疗)耐受

  外泌体在维持CSCs动态平衡中的作用:

  A:CSCs分化为肿瘤细胞,肿瘤细胞去分化为CSCs;

  B&C:外泌体在non-CSCs和CSCs仙湖转换中的作用。

  外泌体通过传递干性相关分子诱导肿瘤细胞去分化获得干性表型;肿瘤来源外泌体也会影响肿瘤微环境中周围细胞,且这些非肿瘤细胞能够通过释放外泌体来促进肿瘤的发生和发展。

外泌体检测

  靶向外泌体信号通路可能打破这一动态平衡,相比于靶向CSCs和non-CSCs治疗,这可能会是新的、更好的治疗策略。

  2.外泌体和自噬

  自噬是一个动态、保守的细胞分解代谢过程,由溶酶体介导的细胞降解系统来降解细胞内过程或受损的细胞器和蛋白聚集体,从而实现能量的再循环。

外泌体检测

  a.早期内涵体-多囊泡体/晚期内涵体-管腔内囊泡(ILV)-外泌体/溶酶体;

  b.起始-吞噬泡-自噬小体-自噬溶酶体-降解和回收;

  c.自噬小体+内涵体=自噬内涵体。

  二、外泌体检测

  关于外泌体检测,Exostep是用于流式细胞仪检测外泌体的强大试剂。该外泌体检测试剂盒是一种简单的免疫珠检测外泌体的方法,使用的是与珠子结合的捕获抗体和与荧光染料偶联的检测抗体。

  【1】具体而明确的检测

  【2】定量分析,荧光与外植体量之间有很好的相关性。

  【3】直接检测细胞培养上清液和生物液中的外泌体。无需分离或沉淀

  【4】需要的样品量非常少

  【5】灵敏度更高,动态范围更广。即使是少量的样品,也能保证检测结果。

  【6】可重复性

  【7】允许外泌体捕获细胞群的同时进行免疫表型分析

  除了外泌体检测试剂盒,广泛而高质量的多检测/物种验证的外泌体标记抗体,对外泌体检测也至关重要。科研道路且慢且长,让我们拭目以待吧~


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