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分子实验难在哪里(没有分子实验基础怎么做实验)

发布时间:2021-12-21 10:55:14 阅读:14592次 来源:百度学术

  分子生物学实验主要包括植物、动物、微生物基因组、DNA的提取与鉴定,哺乳动物组织总RNA的提取与鉴定,质粒DNA的提取与鉴定,PCR扩增,分子杂交技术,限制性内切酶消化,分子克隆全过程和基因文库的构建等实验项目的原理及步骤。

  但其中最终重要的部分——

  第一,PCR实验原理。实验的反应分为哪三步?第一变性,第二退火,第三延伸,这三个阶段的细节都很重要,尤其是延伸。

  第二,大肠杆菌感受态的制备(CaCl2法),这个也是实验原理比较重要。另外这个实验需要注意的部分【①感受态细胞长时间处在常温状态,会严重影响到其转化率,因此应尽量减少常温操作,动作要迅速。②为减少对细胞的机械损伤,操作时动作不能剧烈。③尽量在无菌状态下操作,减少污染的可能。】

  第三,CTAB法提取植物基因组DNA实验原理!

  第四,根据基因序列完成基因的克隆,七个步骤全部要熟悉。

  难点即重点,各个实验的原理、步骤,还有一些注意事项,都是比较复杂的。

实验器材

  对于分子生物学我个人觉得还是理论课比较重要的,而且我们老师之前就说过,在实验中,如果你的理论知识不够强大的话,因为分子生物都是肉眼不能看见的变化过程,一般结果都是只有最后才能知道,也就是说,你耗时很久很久做完实验发现之前不知道哪一步做错了,最后功亏一篑,这时候如果你还不知道理论方面的知识,那么基本上连哪一步做错都不知道,无法分析的话,实验还是很难继续做下去的。

  我个人觉得,对于分子生物学实验来说,PCR技术无疑是最重要的,我的专业不是纯粹的生物学,但是分子生物学是基础学科,而对于这门课来说,我们做的最重要,老师讲解的最细致的一个实验就是PCR了。

  大概来讲解一下这个实验吧,对于我这种专业,我做的是大肠杆菌的PCR,学生物的都知道PCR是什么,我就不多说了,现在实验室的主要仪器就是PCR仪,但是之前的提取过程也是很重要的,我之前做实验有一次的一个样品就是没提取好,最后什么都没有,同时试样过程中的各种试剂、各种用量都非常精细,很多试剂都是无色透明的,一定要细致,把各种试剂的使用量、添加顺序都按实验指导做好,中间的最核心的部分一本都是PCR仪做的,所以还好,一般也不会出什么错,之后还要跑个电泳,跑电泳还是比较简单啦,现在也有各种各样的不同的技术。

  综合来说,分子生物实验就是一定!一定!要细心!这种微量又容易出现意外状况的实验一定要细心,这也就是分子生物最大的难点和重点了吧。

本文链接:https://www.zjby-biotech.com/news/hydt/565.html

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