您的位置:首页>>公司动态>>企业动态

细胞实验外包:细胞成脂、成骨、成神经诱导实验服务

发布时间:2021-11-18 10:07:20 阅读:112372次 来源:晶莱生物

  细胞成脂、成骨、成神经诱导实验操作流程:

  成骨诱导培养液配备与诱导操作:

  1、准备含10%FBS的α-MEM培养液;

  2、在备好的α-MEM培养液中添加50μM 抗坏血酸, 10mmβ-磷酸甘油和100nm地塞米松;

  3、准备6孔培养板,将P4细胞按照5×103个/平方厘米的规格接种于原始α-MEM培养液中;

  4、待细胞长至基本融合后,更换上述制备完成的成骨诱导培养液;

  5、每三天换液一次,细胞长至7天时进行碱性磷酸酶染色;

  6、二十八天后再进行矿化结节的茜素红染色。

  素红染色方法介绍:

  1、去除细胞当前使用培养液,使用PBS清洗两次;

  2、使用10%甲醛室温固定15分钟,完成后使用重蒸馏水冲洗两次;

  3、按照1ml/孔加入40mM的茜素红染色液,室温孵育20min并轻微振荡;

  4、清除掉没有完全结合的染料,用重蒸馏水漂洗并振荡5min重复4次;

  5、倾斜放置2min,吸取多余的重蒸馏水;倒置显微镜观察拍照记录。

素红染色

  成脂诱导培养液配备与诱导操作:

  1、配置FBS10%含量的HG-DMEM培养液;

  2、在配制完成的HG-DMEM培养液中加入1μM地塞米松,10μg/ml胰岛素,200μM吲哚美辛和0.5mM IBMX;

  3、准备6孔培养板,将P4细胞按照2×104个/平方厘米的规格接种于原始HG-DMEM培养液中

  4、待细胞长至基本融合后,更换上述制备完成的成脂诱导培养液培养2天,在用只含有10μg/ml胰岛素的成脂维持培养液培养1天,如此交替循环培养至14天,使用红油O染色。

  红油O染色方法介绍:

  1、去除细胞使用的当前培养液,使用PBS清洗两次;

  2、27.5%甲醛室温固定20分钟;

  3、重蒸馏水清洗3此,空气中干燥;

  4、加入0.5%的红油室温孵育一小时;

  5、配制70%乙醇溶液清洗3次;

  6、倒置显微镜观察拍照记录。

本文链接:https://www.zjby-biotech.com/news/hydt/497.html

注释:[本文仅供阅读]不代表企业及作者的立场,如侵权请联系删除,欢迎分享本文,转载请保留出处!

推荐服务

  • 分子实验

    分子实验平台为广大科研工作提供蛋白、RNA和DNA分子类分析及检测服务···

  • 细胞实验

    细胞实验平台为广大科研工作者提供原代细胞提取、鉴定和培养相关服务···

  • 病理实验

    动物实验平台为广大科研工作者提供动物寄养、疾病模型构建和体内验证···

  • 动物实验

    动物实验平台为广大科研工作者提供科研成果向产品转化的服务,转化方···

  • 精准医疗

    精准医疗平台为癌症患者提供肿瘤移植动物体内服务,模拟患者癌症发展···