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天狼猩红染色操作方法(手把手教你做天狼猩红染色实验)

2023-04-10 10:29:15
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  已知胶原纤维有四型(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ),区分并定量这四种胶原纤维,对于研究病变的发生机理和演变过程有一定的意义。

  实验原理

  天狼猩红(Sirius Red)是强酸性染料,易与胶原分子中的碱性基团结合,吸附牢固。胶原分子与天狼猩红结合后加强双折光现象,使不同颜色和形态的胶原纤维得以区分。

  实验步骤

  01、脱蜡至水:二甲苯Ⅰ 15min二甲苯Ⅱ 15min95%酒精 30s80%酒精 30s75%酒精 30s流水洗 20s

  02、Weigert铁苏木素 10min流水洗 30s

  03、盐酸乙醇 15s流水洗 5min95%乙醇 12s

  04、天狼猩红染液 60min弱酸溶液清洗 24s

  05、无水乙醇 12s重复无水乙醇 12s

  06、晾干后封片

  实验结果

  I型胶原纤维:紧密排列,显示很强的双折光性,呈黄色或红色。

  II型胶原纤维:显示弱的双折光,呈多种色彩的疏松网状分布。

  III型胶原纤维:显示弱的双折光,呈绿色的细纤维。

  IV型胶原纤维:显示弱的双折光的基膜,呈淡黄色。

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