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分子实验-间接免疫荧光的原理及步骤

发布时间:2022-01-09 10:41:53 阅读:110392次 来源:本站

  间接免疫荧光:一种简单而现代的方法

  测试原理

  为了测定自身抗体或针对感染因子的抗体,咳嗽细胞、治疗组织切片或纯化的、生化特征的物质被用作抗原底物。

  如果样品呈阳性,稀释的血清样品中的特异性抗体会附着在与固相偶联的抗原上。

  在第二步中,附着的抗体用荧光素标记的抗人抗体染色,并用荧光显微镜观察。

  阳性样品可以逐步滴定。最合适的滴定间隔由稀释因子 3.162(10 的平方根)提供。这样,每第二步在其分母中表示 10 的整数幂(1:10、1:32、1:100、1:320、1:1000、1:3200、1:10000 等)。

间接免疫荧光

  间接免疫荧光:一种测定自身抗体和针对感染性病原体的抗体的标准化技术

  高特异性:阳性和阴性样本产生的信号强度差异很大。根据各个抗原的位置,每种结合的抗体都显示出典型的荧光模式。

  原始底物的整个抗原谱都可用,从而可以检测大量的抗体,达到更高的检出率。

  免疫荧光能够在一个单一的生物基质上同时检测针对几种生化不同抗原的抗体。

  当单独制备用于酶免疫测定的测试抗原太困难或太复杂时,间接免疫荧光测试是首选的分析方法。

  EUROIMMUN 在间接免疫荧光标准化和现代化方面的创新

  活化技术:物理或化学活化的盖玻片涂有培养的细胞或组织切片。冷冻组织切片通过共价键固定在玻璃表面,增加了 100 倍以上的附着力,从而防止基板脱落。

  BIOCHIP 技术:涂有生物基材的盖玻片在机器上被切割成毫米大小的碎片 (BIOCHIP)。这使得每个组织切片可以获得十个或更多质量均一的一流制剂,并且在培养细胞基质的情况下,甚至数千个。

  BIOCHIP Mosaics ™:在同一个反应场上使用几个并排涂有不同底物的 BIOCHIP,可以同时研究针对各种器官或传染原的抗体。因此,可以用相对较少的努力建立详细的抗体谱,从而可以相互确定不同底物上的结果。

  TITERPLANE ™技术:将样品或试剂应用于试剂托盘的反应区域。然后将 BIOCHIP 载玻片放入试剂托盘的凹槽中,所有 BIOCHIP 都与液体接触,各个反应同时开始。由于流体被限制在封闭空间内,因此无需使用传统的“湿度室”。


本文链接:https://www.zjby-biotech.com/news/hydt/683.html

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