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生物实验中关于琼脂粉常见问题解答!

2021-11-16 10:32:28
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  琼脂粉是由琼脂糖(agarose)和琼脂果胶(agaropectin)组成的,溶解性是琼脂粉不溶于冷水,易溶于沸水,缓溶于热水。检测凝胶强度为1.5%琼脂粉溶液在20摄氏度凝固后,能够表面不破承受的大压强是800-1200g/cm2 在生物学实验中,微生物培养基、植物组培培养基常规添加琼脂粉的用量1.5-2% (工作浓度6-25g/L)。当实验中遇到琼脂粉不凝固时,常规的检测方法时pH值,浓度,温度,充分混匀等情况。

  说明:培养基的配制,工作浓度6-25g/L

  用途:微生物培养基、植物培养基原材料,一般添加量1.5-2%

  琼脂粉默认使用PH为中性, PH小于4则无法凝结,脂粉质检凝胶强度为1.5%浓度,800-1200g/cm2

  琼脂粉常见问题解答:

  一,生物实验中遇到培养基加入琼脂粉后,室温不凝固的原因分析:

  1、培养基PH值过低 ,偏酸,水解,琼脂粉在PH值小于4则无法凝结。

  2、所加琼脂粉质量不够 ,增加用量。搅拌不均匀,倒板前没有充分摇匀,凝固不均匀。

  3、灭菌温度过高,加热时间过长。PH改变或破坏了琼脂的凝固度

  4、培养基没有加热溶解充分,就没有凝固。

琼脂粉

  使用琼脂粉配置的MS培养基颜色明显变黄?影响实验?

  产品批次不一样,有些批次的琼脂粉就是显黄色,不是质量问题,不影响使用。

  进口产品也有直接指出琼脂粉是黄色为正常现象。

  凝胶强度?

  答:凝胶强度(1.5%)≥800g/cm2  800-1200g/cm2,根据不同批次会有不同数值。

  1.5g琼脂粉溶于100ml水,溶解凝固后要放置20℃恒温箱中静置10小时以上,再测定凝胶强度。与温度,水质等有关。

  一般琼脂粉和卡拉胶,夏季使用浓度要比冬季偏高。夏季温度高,保存时间久,可能会有部分降解,所以要达到同样凝胶强度的用量就偏高。

  琼脂粉不凝固

  1、培养基PH值过低 ,偏酸,水解

  2、所加琼脂量不够 ,增加用量。搅拌不均匀,倒板前没有充分摇匀,凝固不均匀。

  3、琼脂质量不过关,琼脂条在使用时添加量要稍微高一点,琼脂粉是不是新买的

  4、灭菌温度过高,加热时间过长。PH改变或破坏了琼脂的凝固度

  5、培养基没有加热溶解够不够,就没有凝固。是不是琼脂加错了,营养琼脂不会凝固。到平板时可以推荐在超净台内吹干晾干,蒸发过多水分。

  PH与琼脂粉?

  答:琼脂粉默认使用PH为中性,一般为7左右,PH小于4则无法凝结,具体的PH与稳定性的检测没有做过,根据经验来说 PH偏碱,凝胶后颜色稍白,PH偏酸,凝胶颜色稍暗。

  琼脂粉做碳源测试,不加碳源细菌仍然能生长,上一批次的就不能生长?

  答:理论上应该不长,一般微生物都不能利用琼脂粉,但某些杂菌仍可以利用,所以要检测到底是琼脂粉纯度问题还是染了杂菌。

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