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2022-04-01
细谈流式细胞分选的原理及特点(流式细胞分选原理解析)
流式细胞仪(Flow Cytometer)是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段,可以每秒钟分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数。其应用范围非常广泛,而且还在不断增加。当然,细胞分选也是它的重要应用之一。它能够根据每个细胞的光散射和荧光特征,将特定的细胞从细胞群体中
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2022-04-01
胶回收和PCR 产物回收技巧(PCR 产物回收的详细方法和步骤)
提高胶回收量的技巧1) 增加电泳时的上样量。2) 电泳缓冲液用新鲜配制的。3) 切胶时尽量只切有条带的胶,减小切胶体积:含目的片断很少的胶就不要要了,不然影响回收率。4) 把切的两块或多块胶融化后,无论多大的体积都用一个管子,转移到同一个柱子上。5) 溶胶时所加的溶液可多一点,这样更有利于D
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2022-04-01
细胞传代的时间如何把握(细胞传代的流程步骤)
细胞传代的时间把握当细胞呈指数增殖,贴壁培养的细胞已占据所有可用基质、没有扩增空间,或悬浮培养的细胞已超过培养基质所支撑的能力,无法进一步生长时,细胞增殖速度将大大降低甚至完全停止。为了将细胞密度维持在最佳水平,以便细胞继续生长,并且刺激进一步增殖,必须对细胞进行传代。养细胞的小伙伴
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2022-04-01
原代细胞培养实验注意事项详解(原代细胞培养的实验过程)
原代细胞培养实验注意事项详解(原代细胞培养的实验过程)原代细胞的培养步骤一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养要求1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;3、培养基可用Eagle(MEM)或DNEM培养;4、小牛血清浓度为10%-80%;
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2022-03-31
细胞凋亡实验步骤及注意事项(细胞凋亡实验具体步骤)
细胞凋亡实验步骤及注意事项(细胞凋亡实验具体步骤)一、实验目的1、掌屋凋亡细胞的形态特征2、学会用荧光探针对细胞进行双标记来检测正常活细胞、凋亡细胞和坏死细胞的方法二、实验原理细胞死亡根据其性质、起源及生物学意义区分为凋亡和坏死两种不同类型。凋亡普遍存在于生命界,在生物个体和生存中起
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2022-03-31
PCR/q-PCR点样技巧详解(PCR/q-PCR怎么点样)
PCR/q-PCR点样技巧:为了多快好省的整理q-PCR的结果(Excel表),选择如下更实用、更方便的点样方式。以实用Bio Rad公司的q-PCR仪为例,点样方式可参考下图:1.所有的试剂都放在冰上操作;2.第一部分:Master Mix和引物加在一起混匀(按照上图中横向蓝色箭头标记的方向点样),第二部分:ddH2O和模板加一
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2022-03-31
免疫共沉淀Co-IP实验操作步骤(免疫共沉淀实验步骤)
免疫共沉淀Co-IP实验操作步骤(免疫共沉淀实验步骤)一、免疫共沉实验原理:免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋
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2022-03-31
检测细胞凋亡的常用方法(最常用的细胞凋亡检测方法是什么)
检测细胞凋亡的常用方法(最常用的细胞凋亡检测方法是什么)细胞死亡的方式主要有两种,包括细胞坏死(necrosis)和细胞凋亡(apoptosis)。细胞坏死是早已被认识到的细胞死亡方式,而细胞凋亡是近年来逐渐被认识且越来越受到重视的细胞死亡方式。两种死亡方式最重要的区别是细胞坏死会释放出细胞内溶物,引起炎症反应,而
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2022-03-30
siRNA表达载体的构建步骤详解和注意事项
siRNA 表达载体构建可以:(1)作为后基因组时代基因功能分析的有力工具;(2)应用于基因组学、细胞信号传导通路分析;(3)用于药物靶点筛选、疾病治疗。实验方法原理多数的 siRNA 表达载体依赖三种 RNA 聚合酶 III 启动子(pol III)中的一种,操纵一段小的发夹 RNA(short hairpinRNA, shRNA)在哺乳动物细
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